イネ、オオムギを用いた遺伝子タッギング法の開発

利用水稻和大麦开发基因标记方法

• 批准号: 05760050
• 负责人: 林 浩昭
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760050/
• 关键词: auxin; AXI; barley; rice; protoplast; T-NDA tagging

生化学的手法によらずに新しい遺伝子を単離する方法として遺伝子タッギング法がある。現在、タバコ、シロイヌナズナなど一部の植物において成功しているこの方法は、今後、植物の有用な遺伝子単離の大きな武器になると考えられている。本研究では、まず、遺伝子タッギング法がイネやオオムギなどにも応用できるのかを確かめることを目的としたが、現在まで、最も基本的な技術であるプロトプラストの効率よい形質転換法を見いだすには至らなかった。そこで、タッギング法が有効であることを確認するために、既にT-DNAタッギング法により得られている遺伝子AX1159について詳しく調べてみることにした。この遺伝子は、タバコプロトプラストにオーキシン非要求生を付与することができる。AX1159のcDNAをプロープにしてイネのゲノムライブラリーをスクリーニングしたところ、陽性のクローンを2種類得ることができた。部分塩基配列を決定したところ、これらのクローンはタバコAX1159遺伝子とアミノ酸レベルで75%以上の相同性を有していることが明らかになった。また、発現様式もタバコにおけるそれと同様に、根において発現しており、オーキシンにより誘導された。以上のことから、T-DNAタッギング法により得られたAX1159遺伝子は、イネにも存在し機能していることが明らかになった。このことは、タッギング法が有用な遺伝子をクローニングするために重要な手法となりうることを示している。さらに、この遺伝子が植物におけるシグナル伝達に関与していることを想定し、イネにおいてシグナルの長距離輸送を司る器官である節管内にタンパク質リン酸化酵素の検出を試みたところ、カルシウム依存性のタンパク質リン酸化酵素を見いだすことができた。今後は,AX1159遺伝子とシグナル伝達の関連を追求することで、その機能解明に迫っていきたい。

New biochemical methods に よ ら ず に し い heritage 伝 son を 単 from す る method と し て heritage 伝 son タ ッ ギ ン グ method が あ る. Now, タ バ コ, シ ロ イ ヌ ナ ズ ナ な ど a の plant に お い て successful し て い る こ の way は, useful in the future, plant の な but 伝 単 before の big き な weapons に な る と exam え ら れ て い る. This study で は, ま ず, but 伝 タ ッ ギ ン グ method が イ ネ や オ オ ム ギ な ど に も 応 with で き る の か を か indeed め る こ と を purpose と し た が, now ま で, the most basic も な で あ る プ ロ ト プ ラ ス ト の sharper rate よ を see い い shape quality planning in method だ す に は to ら な か っ た. そ こ で, タ ッ ギ ン が グ method have sharper で あ る こ と を confirm す る た め に, both に T - DNA タ ッ ギ ン グ method に よ り have ら れ て い る posthumous son 伝 AX1159 に つ い て detailed し く adjustable べ て み る こ と に し た. The <s:1> cultural heritage 伝 child 伝, タバコプロトプラストに 伝 <s:1> キシ キシ を insisted on being passed on を to する とがで とがで る る る る る る. AX1159 の cDNA を プ ロ ー プ に し て イ ネ の ゲ ノ ム ラ イ ブ ラ リ ー を ス ク リ ー ニ ン グ し た と こ ろ, positive の ク ロ ー ン を 2 species have る こ と が で き た. Some salt base with column を decided し た と こ ろ, こ れ ら の ク ロ ー ン は タ バ コ AX1159 heritage 伝 son と ア ミ ノ acid レ ベ ル で 75% gay を の are し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. ま た, 発 presently others も タ バ コ に お け る そ れ と with others に, root に お い て 発 now し て お り, オ ー キ シ ン に よ り induced さ れ た. Above の こ と か ら, T - DNA タ ッ ギ ン グ method に よ り have ら れ た AX1159 heritage 伝 は, イ ネ に も exist し function し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. こ の こ と は, タ ッ ギ ン が グ method useful な heritage 伝 son を ク ロ ー ニ ン グ す る た め に important な gimmick と な り う る こ と を shown し て い る. さ ら に, こ の posthumous son 伝 が plant に お け る シ グ ナ ル 伝 da に masato and し て い る こ と を し scenarios, イ ネ に お い て シ グ ナ ル の long-distance conveying を department る organ で あ る section tube に タ ン パ ク qualitative リ ン acidification enzyme の 検 try out を み た と こ ろ, カ ル シ ウ ム dependency の タ ン パ ク qualitative リ ン acidification enzyme を see い だ す こ と が で き た. The next は AX1159 heritage 伝 son と シ グ ナ ル 伝 da の masato even を pursuit す る こ と で, そ の function interpret に forced っ て い き た い.

项目成果

Hiroaki HAYASI: "Changes in Amino Acid Composition and protein Modification in Phloem Sap of Rice" Plant Nutrition-from genetic engineering to field practice. 185-188 (1993)

Hiroaki HAYASI：《水稻韧皮部汁液中氨基酸组成和蛋白质修饰的变化》植物营养——从基因工程到田间实践。