平滑筋及び非筋細胞におけるカルデスモンの転写調節

平滑肌和非肌肉细胞中钙结合蛋白的转录调控

• 批准号: 05770077
• 负责人: 林 謙一朗
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770077/
• 关键词: カルデスモン; アクトミオシン系制御; 平滑筋細胞; プロモーター; エンハンサー; 転写制御

ニワトリ・カルデスモン(CaD)遺伝子の5'‐上流域の解析を進めた結果、砂嚢筋型CaDmRNAの5'‐noncoding領域は3つエクソン(エクソン1a-1、1a-2及び1a-3)から成り、エクソン1a-3は翻訳開始コドンを含む。また脳型CaDmRNAの5'‐noncoding領域および翻訳開始コドンはエクソン1bにコードされており、これらのエクソンは1a-1、1a-2,1a-3,そして1bの順序で配置されていることが判明した。プライマーエクステンションおよびchick embryo fibroblast(CEF)を用いたCATアッセイによりエクソン1a-1および1bの上流域はそれぞれ独立したプロモーター(砂嚢筋型と脳型)であることを明らかにした。CATアッセイおよび特異的プローブを用いたノーザンブロットにより砂嚢筋型プロモーターは強力な転写活性を示した。これに対し脳型プロモーターの転写活性は弱い。砂嚢筋型プロモーターの詳細な解析を行った結果、組織特異的な転写を制御している地域の同定に成功した。転写開始サイトから上流‐217までがプロモーターの基本構造で、‐372から‐218が制御領域である。制御領域は抑制領域(‐372から‐346)と活性化領域(‐315から‐218)の2つのドメインから成る。この活性化領域のみをクローニングしたプラスミドを用いたin vivoコンペティションアッセイによりプロモーター活性の抑制が認められた。これらの結果からCaDの組織特異的な発現は活性化領域内に存在するシス因子とこれに結合するトランス因子によって制御されていることが示唆された。また、この活性化領域を逆方向にしてもプロモーター活性は影響されないことからエンハンサーであると考えられる。

The results of the analysis of the upper basin, the results of the analysis of the upper basin, In the field of CaDmRNA and 5'-noncoding, we will begin to improve the quality of the products. The first step is to determine the accuracy of the configuration. The first step is to determine the performance of the system. The first step is to determine the performance of the system. The first step is to determine the accuracy of the configuration. The chick embryo fibroblast (CEF) is divided into two parts, namely, CAT, 1a-1, 1b, upper watershed, independent, sand rib, and so on. The CAT equipment is used to show the strength of the steel bar in the sand bar. The writing activity is weak. The results of the analysis of the results of the data analysis and the writing of the organizational characteristics are the same as those of the success story. To start writing, you should start to improve the quality of the basic production system-217-372-218 to control the field of operation. Control field control domain (- 372-346) "active field (- 315-218)" 2% control domain (- 372-346). In the field of activation, the activity was suppressed by the use of in vivo. The results show that in the field of activation of the CaD organization, there is a significant increase in the number of factors associated with the activity of the organization. In the field of activation, in the opposite direction, the field of activation is in the opposite direction.

项目成果

Haruna,M.: "Common structual and expressional properties of vertebrate caldesmon genes" Biochem.Biophys.Res.Commun. 197. 145-153 (1993)

Haruna,M.：“脊椎动物 caldesmon 基因的常见结构和表达特性”Biochem.Biophys.Res.Commun。