毒素原性大腸菌の産生するLTのAサブユニットの末端アミノ酸の生物学的役割の解析

产毒大肠杆菌LT A亚基末端氨基酸的生物学作用分析

• 批准号: 05770199
• 负责人: 今村 誠司
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770199/
• 关键词: 毒素原性大腸菌; LT; ホロ毒素

全世界で今尚下痢症にり患する5歳以下の小児は7〜10億に達し、その内500〜1000万人が死亡している。その下痢原因菌として毒素原性大腸菌(ETEC)が20%を占める。ECECは下痢毒素LTを産生し、毒素のワクチン開発は急務とされている。そこでワクチン開発及びLTを用い他の抗原物質の抗原性の発揮の手助けをするキャリアー蛋白質の開発に寄与するため本研究を企画し、LTのAサブユニットのN末端のアミノ酸がホロ毒素形成にどのように関与をしているか、アミノ酸欠損株を作成することにより解析してきた。その結果まず、N末端のアミノ酸を数個保存することにより、Aサブユニットが分泌されることを明らかにした。さらにこのアミノ酸を保存して5、10、30、40、100個のアミノ酸を遺伝子操作により欠如させ、抗原性の変化、ホロ毒素形成の変化を解析した。その結果N末端より1〜5、5〜10、10〜100位のアミノ酸が抗原決定基に関与することを明らかにした。さらに6〜9位のアミノ酸を欠損させることにより、変異Aは産生されるが、ホロ毒素は形成されないことが明らかになった。一般にA,BサブユニットはAのA2フラグメント(192〜243位)により会合していると考えられている。これ以外に146位のArgがBと接触していると報告されている。しかし結晶解析結果によれば、6〜9位のアミノ酸はBサブユニットより離れた位置に存在し、ホロ毒素形成には関与していない。従って、これらの結果はN末端アミノ酸が出来上がったホロ毒素の形成に関与するよりは、むしろホロ毒素の形成段階に関与している可能性が示唆される。

で all over the world today is diarrheal disease に り with す る の under five showed little where は 7 ~ 1 billion に し, そ の within 500 ~ 10 million dead が し て い る. Youdaoplaceholder0 pathogenic bacteria causing diarrhea と て て toxogenic escherichia coli (ETEC)が20%を account for める. Ecec<s:1> dysentery toxin LTを produces, toxin ワ チ チ ワ initiates emergency とされて る る. そ こ で ワ ク チ ン 発 and open び LT を him with い の antigen の antigenicity の 発 の waved hands to help け を す る キ ャ リ ア ー protein の open 発 に send す る た め を enterprise this study draw し, LT の A サ ブ ユ ニ ッ ト の N terminal の ア ミ ノ acid が ホ ロ toxin formation に ど の よ う に masato and を し て い る か, ア ミ ノ acid owe damage strain を made す る こ と に よ り Analyze て て た. そ の results ま ず, N terminal の ア ミ ノ acid を several save す る こ と に よ り, A サ ブ ユ ニ ッ ト が secretion さ れ る こ と を Ming ら か に し た. さ ら に こ の ア ミ ノ acid を save し て 5, 10, 30, 40, 100 の ア ミ ノ acid を heritage 伝 sub operations に よ り owe such as さ せ, antigenicity の variations, ホ ロ toxin formation の variations change を parsing し た. そ の results N terminal よ り 1 ~ 5, 5 ~ 10, 10 ~ 100 の ア ミ ノ acid が epitope に masato and す る こ と を Ming ら か に し た. さ ら に 6 ~ 9 の ア ミ ノ acid を owe loss さ せ る こ と に よ り, - different A は generate さ れ る が, ホ は ロ toxin formation さ れ な い こ と が Ming ら か に な っ た. General に A, B サ ブ ユ ニ ッ ト は A の A2 フ ラ グ メ ン ト (192 ~ 243) に よ meet り し て い る と exam え ら れ て い る. Other than されて れ, に146 <s:1> ArgがBと were exposed to <s:1> て ると ると ると reports されて る る る. し か し crystallization resolution result に よ れ ば, 6 ~ 9 の ア ミ は ノ acid B サ ブ ユ ニ ッ ト よ り from れ た position に し, ホ ロ toxin formation に は masato and し て い な い. 従 っ て, こ れ ら の results は N terminal ア ミ ノ acid が out on が っ た ホ の ロ toxin formation に masato and す る よ り は, む し ろ ホ の ロ toxin formation Duan Jie に masato and し て い が る possibility in stopping さ れ る.

项目成果

Takao Tsuji and Seiji Imamura et al: "Construction of plasmids useful for production of the B subunit of cholera toxin from Vibriocholerae or a heat-labile enterotoxin from enterotoxigenic Escherichiacoli." Eur.J.Epidemiol.inpress.

Takao Tsuji 和 Seiji Imamura 等人：“构建可用于从霍乱弧菌生产霍乱毒素 B 亚基或从产肠毒素大肠杆菌生产不耐热肠毒素的质粒。”

Takashi Inoue and Seiji Imamura et al: "Amino acid sequence of heat-labile enterotoxin from chicken enterotoxigenic Escherichia coli is identical to that of human H 10407 strain." FEMS.Microbiol.Lett.108. 157-162 (1993)

Takashi Inoue 和 Seiji Imamura 等人：“来自鸡产肠毒素大肠杆菌的不耐热肠毒素的氨基酸序列与人类 H 10407 菌株的氨基酸序列相同。”