Vibrio mimicusにおけるコレラ毒素様毒素産生遺伝子の解析

拟态弧菌霍乱毒素产生基因分析

• 批准号: 05770259
• 负责人: 勢戸 和子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka Prefectural Institute of Public Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770259/
• 关键词: Vibrio mimicus; Cholera enterotoxin(CT); CT-like toxin; Vibrio cholerae; ctx; toxR

Vibrio cholerae01の産生するコレラエンテロトキシン(Cholera enterotoxin:CT)と免疫学的に区別できない類似の毒素(CT-like toxin:CLT)を産生するVibrio mimicusから染色体遺伝子を抽出し、CT遺伝子(ctx)との相違を調べた。当研究所でV.cholerae01 569B株からクローニングしたctxの一部をプローブにして、サザン・ハイブリダイゼーションを行ったところ、V.cholerae01 569Bでは、制限酵素EcoRI、PstIの二重切断で得られた5.1kbおよび5.4kbの2本のDNA上にctxが位置していたが、V.mimicusでは、ClaI、HincIIの二重切断で得られた1.9kbのDNAがctxプローブとハイブリッドを形成した。この1.9kbのDNA断片をクローニングしたが、塩基配列を決定するまでには至らなかった。しかしながら、コロニー・ハイブリダイゼーションでは、CTと相同性の高い易熱性毒素(LT)産生毒素原性大腸菌を検出しない条件で、CLT産生V.mimicusを検出することから、CLTとCTの相同性はDNAレベルで80%以上であると考えられる。次に、毒素の構造遺伝子を制御している調節遺伝子について比較した。V.cholerae01では、毒素産生性や腸管定着性を調節する遺伝子としてtoxR、toxSが知られており、またこの調節システムは病原性Vibrio属に共通であるという報告もある。そこで、toxRを検出するプライマーをデザインし、PCRを行った。その結果、V.choleraeでは、CT産生性の有無にかかわらずtoxRは検出されたが、V.mimicusでは、CLT産生株においてもtoxRは検出されなかった。V.mimicusとV.choleraeは、同定上sucrose分解性が異なるだけで非常に近縁であり、培養液中に産生される毒素量も差がないという報告もあるが、本研究の結果からは、毒素遺伝子の発現調節メカニズムに相違があり、それが臨床症状の違いにつながっていると推察される。

Vibrio choleras 01 is produced in a manner that differs from that of its immunological counterpart, Cholera enterotoxin (CT), CT-like toxin (CLT), and Vibrio mimicus is produced in a manner that differs from that of its chromosomal gene (CTX). When V. cholerae01 569B strain was isolated from the genome of the plant, a part of ctx was isolated from the genome of the plant. The double cleavage of EcoRI and PstI was 5.1kb and 5.4kb. The position of ctx on the DNA of the plant was 5.1kb and 5.4kb. HincII double cleavage resulted in the formation of 1.9kb DNA. The 1.9 kb DNA fragment was identified by DNA sequencing. In the case of C. coli, CLT produces V. mimicus. Second, the toxin structural gene control, regulatory gene control, comparison V.cholerae01 is a common pathogen of pathogenic Vibrio species. The first step is to remove the virus from the virus and remove it from the virus. As a result, V. choleras, CT, and V. mimicus produced strains. V.mimicus and V. choleras are different in decomposition properties of sucrose, and different in toxin production in culture medium. The results of this study are different in regulation of toxin production and clinical symptoms.