モノクローナル抗体によるマウス巨核球の精製と血小板産生機構の解析

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造血機構の研究は極めて早い速度で進行しているにもかかわらず、巨核球/血小板産生系に関する研究は、他の細胞系列に比べ極めて立ち遅れている。血小板産生に直接的、特異的に作用するサイトカイン(トロンポポイエチン)は、臨床上重要であるが未だ同定されていない。巨核球/血小板系の研究が立ち遅れている原因として、1)形態学的には判別が容易であるものの、骨髄に微量しか存在しないために純化が困難なこと、2)成熟に伴う細胞膜表面分子の消長がほとんど解明されていないこと、3)血小板産生をin vitroで再現できる実験系が皆無であること、などか挙げられている。上記の1)および2)の問題点を解決することを目標にして、マウス血小板に対するモノクローナル抗体1C2(アルメニアハムスター由来)の確立に成功した。1C2はマウス血小板および巨核球とのみ反応するとともに、ラットにおいても同様の反応性を示す極めて有用な抗体である。1C2抗体はマウス血小板膜表面の約74Kdの糖蛋白分子(ノイラミニダーゼ処理により約67Kdに減少)と反応するとともに、トロンビンによる血小板活性化にて表面より消失し、上清中に約69Kdの低分子となって放出されることが判明した。このような生化学的特徴は、ヒト血小板GPVに極めて類似している。また巨核球DNA ploidyをパーコール比重遠心と1C2抗体の併用による特異的分離法で検索すると、正常マウスに比しヒトG-CSFトランスジェニックマウス(国立小児医療研究センター病理研究室にて作製)ではmodal DNA量が16Nから8Nに変位していることが判明した。マウス(ラット)血小板、巨核球に特異的に反応する抗体の報告は、世界でも稀であり、1C2抗体はマウス(ラット)巨核球/血小板の研究に極めて有用であると考えられる。