新生児仮死による脳障害の成因と予防に関する研究、特にCa-ATPaseについて

新生儿窒息脑损伤特别是Ca-ATPase的原因及预防研究

• 批准号: 05770561
• 负责人: 山口 克彦
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05770561/
• 关键词: 低酸素性虚血性脳障害; Free radicals; Ca^<++>‐stimulated,Mg^<++>‐dependent ATPase; ATP‐dependentCa^<++> uptake; NOラジカル

[結果]1.ATPase活性の測定:日齢8の脳Synaptosomal Menbranesのhigh‐affinity Ca^<++>‐stimulated,Mg^<++>‐dependent ATPase(以後、Ca,Mg‐ATPase)活性値は低酸素負荷により活性値の低下を認めた(対象群値、21.25nmol/mg・protein/min、直後、負荷後15分、30分の値はそれぞれ対照群値の81.9%、28.5%、23.6%)。Mg^<++>‐independent Ca ATPase(以後Ca‐ATPase)活性値は、低酸素負荷により活性値(対象群値、16.17n mol/mg・protein/min、それぞれ対照群値の93.6%,89.4%,89.9%)はいずれも若干の低下を認めた。2.脳Synaptosomal MenbranesのATP‐dependent Ca^<++>uptake(以後Ca^<++>uptake)の測定:Ca^<++>uptakeは低酸素負荷により活性値は低下した(対照群値、0.865p mol/mg・protein/min、それぞれ対照群値の81.5%,26.5%,54,4%)。3.薬物(N^W‐nitro‐L‐arginine methyle ester(L‐NAME)、N^W‐nitro‐D‐arginine methyle ester(D‐NAME)、L‐arginine、D‐arginine)腹腔内投与におけるCa^<++>uptakeの測定:負荷後15分値のCa^<++>uptakeは、L‐NAME投与群では対照群値のそれぞれ82%、74%と低下の程度の軽減を認めた。一方、D‐NAME、L‐arginine、D‐arginine投与群ではそれぞれ対照群値の14%、41%、45.9%と負荷のみの群と同程度か又若干の回復を認めたが、低値であった。[結論]新生仔期の低酸素ガス負荷はラット新生仔脳のCa,Mg‐ATPase活性を低下させ、脳神経細胞のCa^<++>維持機構障害を認めた。また、Ca^<++>uptake、すなわちendoplasmic reticulumへの細胞質ゾルからのCaイオン流出の低下を引き起こした。その障害は負荷中より負荷後の回復期に強く、reperfusionによるラジカルの関与や、この酵素の障害がCa^<++>uptakeの低下に強く関与していることが示唆された。又障害はL‐NAME投与群で軽減していることから、Ca,Mg‐ATPaseの活性障害にNOラジカルの関与が示唆された。

[Results] 1. Determination of ATPase activity: Synaptosomal Menbranes of high affinity Ca^<++>‐stimulated,Mg^<++>‐dependent ATPase(Ca,Mg‐ATPase) activity values were lower than those of low acid loading (group values, 21.25 nmol/mg·protein/min, after loading, 15 min, 30 min). Mg^<++>‐independent Ca ATPase activity value, low acid load, activity value (group value, 16.17n mol/mg·protein/min, group value, 93.6%, 89.4%, 89.9%), low acid load, activity value (group value, 16.17n mol/mg·protein/min, group value, 93.6%, 89.4%, 89.9%). 2. Determination of ATP-dependent Ca^<++>uptake of Synaptosomal Menbranes: Ca ^<++> uptake decreased the activity value under low acid load (group value, 0.865pmol/mg·protein/min, group value, 81.5%, 26.5%, 54,4%). 3. Determination of Ca^<++> uptake after intraperitoneal administration of drugs (N^W‐nitro‐L‐arginine methyle ester(L‐NAME), N^W‐nitro‐D‐arginine methyle ester(D‐NAME), L‐arginine, D‐arginine): Ca^<++> uptake at 15 min after loading, L‐NAME administration and group anti-irradiation group were 82%, 74% lower than control group. A party, D‐NAME, L‐arginine, D‐arginine cast and group values are 14%, 41%, 45.9% respectively, and the load of the group is the same. [Conclusion] Hypoacidity load in neonatal period decreases Ca,Mg-ATPase activity in neonatal rats, and Ca^<++> maintenance mechanism in neurons is impaired. Ca ^++>uptake, cytoplasmatic reticulum, Ca^++> efflux, Ca ^++> uptake, Ca ^++> uptake, Ca ^+> uptake, Ca ^ In the recovery period after the load, the enzyme damage is reduced, and the Ca^++>uptake is reduced. The activity of Ca,Mg-ATPase was also affected by NO concentration in the L-NAME group.