神経細胞分化過程においてドレブリンE及びA蛋白が細胞骨格に及ぼす影響に関する研究

神经元分化过程中drebrin E、A蛋白对细胞骨架影响的研究

• 批准号: 05771037
• 负责人: 池田 圭朗
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771037/
• 关键词: ドレブリン; 細胞骨格; 神経発生; 遺伝子導入

申請者らが同定したドレブリンは神経系の発生過程で特徴的に発現する蛋白質であり、ヒトでは2種類の蛋白質アイソフォームEとAが確認されているが、ドレブリンAは分化した神経細胞のみに特異的に発現されている。既に申請者らは、L細胞にドレブリンA cDNAを導入してドレブリンを一過性に発現させると、神経突起様変化を生じるという実験結果を得ている。そこで、今回はメタロチオネインIプロモーターとドレブリンAcDNAを用いて非神経細胞にドレブリンAを発現を誘導し、さらにその発現量を変化させて、細胞形態の変化について細胞骨格、特にアクチンとの関連から解析を試みた。メタロチオネインI(MTI)プロモーターを持つベクターにG418耐性遺伝子およびドレブリンA cDNAを組み込んだベクターをリン酸カルシウム共沈法により、L-cellにco-transfectし、G418をマーカーとしてドレブリン遺伝子導入細胞をクローニングしてtransformantを得た。こうして安定な形質転換線維芽細胞を確立し、Cdによってドレブリンを誘導発現させた。M2F6抗体を用いたwestern blotにより定性的に解析したところ、添加Cd量の増加に伴ってドレブリン発現量が増加した。このとき、細胞形態の変化は見られなかったが、免疫組織染色を行ってドレブリンとアクチンの細胞内局在の変化を見てみると、大部分の細胞においてストレスファイバーが複雑に交差するようになり、一部には太く蛇行するアクチンの束を認めた。

The applicant makes sure that the information system is the key to the health process, that is, the production of proteins such as protein, protein and protein. Both the applicant and the cDNA were registered as soon as they had sex with each other, and the result of the test was satisfactory. This time, this time, we need to know that we need to use the AcDNA to display the data guide, to measure the size of the cell, to change the shape of the cell, and to analyze the data of the cell. I (MTI)

项目成果

Keiro Ikeda: "DOREBRIN PROTEINS EXPRESSED IN NON-NEURONAL CELLS PRODUCED MORPHOLOGICAL CHANGES THROUGH EFFECTS ON CYTOPIASMIC ACTIN NETWORKS" Neurochemical Research. 18. 856-856 (1993)

Keiro Ikeda：“非神经细胞中表达的 DOREBRIN 蛋白通过影响细胞质肌动蛋白网络产生形态变化”神经化学研究。

池田圭朗: "非神経細胞に誘導発現されたドレブリン蛋白のF-アクチンに及ぼす影響" 神経組織の成長、再生、移植. 4. 30-31 (1992)

Keio Ikeda：“在非神经元细胞中诱导和表达的 Drebrin 蛋白对 F-肌动蛋白的影响”神经组织的生长、再生和移植。 4. 30-31 (1992)。

池田圭朗: "非神経細胞に発現したドレブリン蛋白が細胞骨格及び細胞接着に及ぼす影響" 神経組織の成長、再生、移植. 5. 33-34 (1993)

Keio Ikeda：“非神经元细胞中表达的drebrin蛋白对细胞骨架和细胞粘附的影响”神经组织的生长、再生和移植。5. 33-34 (1993)。

池田圭朗: "非神経細胞に発現したドレブリン蛋白が細胞接着に及ぼす影響" 神経化学. 32. 358-359 (1993)

Keio Ikeda：“非神经元细胞中表达的 Drebrin 蛋白对细胞粘附的影响”《神经化学》32. 358-359 (1993)。

池田圭朗: "非神経細胞に誘導発現されたドレブリン蛋白による突起形成及び細胞骨格の変化" 神経化学. 31. 564-565 (1992)

Keio Ikeda：“在非神经元细胞中诱导的 Drebrin 蛋白诱导的突起形成和细胞骨架变化”《神经化学》31. 564-565 (1992)。