Porphyromonas gingivalisの血清型による比較検討-特にchymotrypsinlike proteaseについて-

牙龈卟啉单胞菌血清型的比较研究 - 特别是胰凝乳蛋白酶样蛋白酶 -

• 批准号: 05771629
• 负责人: 音琴 淳一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771629/
• 关键词: Porphyromonas gingivalis; Chymotrypsinlike protease

歯周疾患に関与しているPorphyromonas gingivalisは種々のproteaseを産生しいおり、このうち4種の菌株については同種の酵素すらわち細菌の組織内侵入に際し、上皮細胞に直接障害を与え、基底膜の主要成分であるtypeIV collagenあるいはラミニンを分解するchymotrypsinlike proteaseの産生を確認した。そこでさらに他の血清型に基ずく本酵素の比較及び本酵素産生遺伝子の解析を目的として実験を行った。通法に基き各菌株よりchromosomal DNAを抽出し、Sau3A1にてpartial digestionし、クローニングベクターを用いてclone bankを作製した。こののちスクリーニングによりchymotrypsinの人工基質であるSAAPNAを加水分解しうるクローンを選択すると共に、それぞれのpositive cloneをベクターに組み替えた後に本酵素産生をコードする遺伝子の特定されるものを決定した。この結果、どの血清型においても本酵素を産生する遺伝子が存在することおよびそのクローンを特定できたのち遺伝子解析(塩基配列の解析)を行うと共に、各菌株間のchymotrypsinlike protease遺伝子の相似性を知るためにハイブリダイゼーションを行った結果、遺伝子解析の結果の一部と合わせて本酵素を産生する遺伝子構造には各血清型相互間の類似性が示された。現在、塩基配列の解析及び本酵素タンパクの精製を行っており、そののち歯肉結合組織成分であるコラーゲンおよび歯肉由来上皮細胞および線維芽細胞への影響をも検討を予定している。

The four strains of peripheral disease, Porphyromonas gingivalis, protease, and E. coli invaded the tissue of the same enzyme, the epithelial cells were directly damaged, and the basement membrane was identified by the main components of typeIV collagen, typeIV collagen, DNA, and chymotrypsinlike protease. The serotype of other serotypes, the gene of this enzyme and the analysis of the child of this enzyme. According to the general method, the strains were extracted by chromosomal DNA, Sau3A1 was extracted by clone bank, and the strains were extracted by clone bank. This enzyme is used in the production of chymotrypsin. The artificial base is SAAPNA and the water is decomposed into water. This is the best way to make a decision. After that, the enzyme is used to produce the enzyme. After that, the enzyme is used to make a decision. The results of the test, the serotype mutagenesis, the production of this enzyme, the existence of the truncation, the subanalysis of the specific enzyme, the analysis of the sequence, the similarity of the chymotrypsinlike protease fragments among the strains, the results of the sequence analysis, the results of the sequence analysis, the results of the sequence analysis, The results showed that the serotypes of each serotype were similar to each other. At present, the basic alignment analysis and the enzyme enzyme assay are used to determine the origin of the epithelial cells, the origin of the epithelial cells, the growth lines of the epithelial cells and the tissue components of the tissue, such as the origin of the epithelial cells, the lines of the germ cells, the cells and the cells.