肥満細胞における分泌気候と核内及び細胞質カルシウム濃度の関連についての研究

肥大细胞分泌气候与核、胞浆钙浓度关系的研究

• 批准号: 05771954
• 负责人: 平嶋 尚秀
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771954/
• 关键词: エクソサイトーシス; 肥満細胞; 細胞内Ca濃度; Ca振動; 核内Ca濃度; 興奮分泌連関; 共焦点レーザー顕微鏡; Fluo-3

1.エクソサイトーシスにおいて重要な役割を果たしている細胞内のCa濃度を細胞質領域と核領域に分けて測定した。1個の細胞内Ca濃度の測定は、Ca濃度感受性蛍光色素Fluo-3を用い、画像処理装置付きの蛍光顕微鏡及び共焦点レーザー顕微鏡を使って観察した。(1)細胞内Ca濃度の振動:0.1mug/mlのcompound48/80で刺激したラット腹腔肥満細胞の細胞質と核質の両方でCa濃度の振動が観察された。(2)細胞内Ca濃度の一過性の上昇:1mug/mlのcompound48/80では、Ca濃度振動は観察されず、一過性のCa濃度上昇のみが観察された。このことは細胞質と核質の両方で観察されたが、核質のCa濃度の方が細胞質より高くなった。2.エクソサイトーシスと細胞内Ca濃度の上昇をそれぞれキナクリンとCa感受性蛍光色素を用いて同時に測定した。(1)細胞内Ca濃度振動とエクソサイトーシスの関係:細胞内Ca濃度振動は見られたがエクソサイトーシスに伴うキナクリンの蛍光の減少は見られなかった。従って、Ca濃度振動とエクソサイトーシスには相関がないことがわかった。(2)細胞内Ca濃度の一過性の上昇:一過性のCa濃度上昇の後にエクソサイトーシスによるキナクリンの蛍光の減少が観察された。Ca濃度の上昇以前にエクサイトーシスがおこることはなかった。3.エクサイトーシスに対する外液Ca濃度の影響細胞外のCaをEOTAでキレートして、細胞外のfree Ca濃度を低くしても細胞内の一過性Ca濃度上昇はおこり、かつエクソサイトーシスも観察された。以上のことより、エクソサイトーシスは細胞内Ca濃度振動とは関係なく、一過性のCa濃度上昇と相関がること。そしてその一過性のCa濃度上昇は細胞内のCaストアからのCaだけでもおこり、かつエクソサイトーシスを惹起するに十分であることが明かとなった。

1. Determination of intracellular Ca concentration in cytoplasm and nucleus The measurement of intracellular Ca concentration, the use of Ca concentration-sensitive fluorescent pigment Fluo-3, and the use of image processing devices such as fluorescent microscopes and confocal microscopes (1)Vibrations of intracellular Ca concentration: 0.1mug/ml of compound 48/80. Vibrations of intracellular Ca concentration in cytoplasm and cytoplasm of abdominal fat cells were observed. (2)Transient increase of intracellular Ca concentration: 1 mug/ml compound 48/80, Ca concentration oscillation, transient increase of Ca concentration. The concentration of Ca in the cytoplasm is higher than that in the cytoplasm. 2. The increase of intracellular Ca concentration was measured simultaneously with the use of Ca-sensitive pigments. (1)The relationship between intracellular Ca concentration vibration and Ca concentration change: intracellular Ca concentration vibration is accompanied by a decrease in intracellular Ca concentration.従って、Ca浓度振动とエクソサイトーシスには相关がないことがわかった。(2)Transient increase in intracellular Ca concentration: transient increase in Ca concentration followed by a decrease in light intensity Ca concentration before rise 3. The effect of extracellular Ca concentration on extracellular Ca concentration, extracellular free Ca concentration, and intracellular Ca concentration. The above-mentioned changes in intracellular Ca concentration are related to changes in intracellular Ca concentration, and transient changes in Ca concentration are related to changes in intracellular Ca concentration The transient increase in Ca concentration in the cells caused a significant increase in Ca concentration.