卵白アビジンのビオチン結合部位の構造解析

蛋清亲和素生物素结合位点的结构分析

• 批准号: 05780460
• 负责人: 数田 恭章
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyushu Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780460/
• 关键词: アビジン; ビオチン結合部位; 化学修飾; ピリドキサールリン酸

アビジンのビオチン結合部位に存在するアミノ酸残基の同定を行うために既存の標識試薬のうちで今回の研究にあった標識試薬の検索を行った.今回,検索を行った化合物のうちピリドキサールリン酸が卵白アビジンに結合することが,ピリドキサールリン酸のシッフ塩基由来の差吸収スペクトルから明らかになった.その差吸収スペクトルはビオチンの添加により消失することからピリドキサールリン酸はアビジンのビオチン結合部位に特異的に結合するものと考えられた.ピリドキサールリン酸はリジン残基に特異的な化学修飾試薬であるため,アビジンのビオチン結合部位にリジン残基が存在していることが明らかとなった.そこで標識部位の同定を行うために水素化ホウ素ナトリウムによるピリドキサールリン酸の還元固定を試みたが,そのシッフ塩基を還元固定することはできなかった.この結果よりアビジンのビオチン結合部位は水素化ホウ素ナトリウムの接近も許さないほどの疎水的な環境になっていることが分かった.このビオチン結合部位の疎水的な環境が,不可逆的と言ってよいほどの強固で,しかも特異的なアビジンのビオチン結合に必要なものであることが示唆された.また,疎水的な環境にあるピリドキサールリン酸を還元固定する方法としてこれまでにジャガイモ塊茎ホスホリラーゼにおいて用いられた変性剤の存在下,水素化ホウ素ナトリウムを用いて還元を行うという方法を適用した.その結果,ピリドキサールリン酸由来の蛍光を測定することによりアビジンにピリドキサールリン酸が還元固定されることが明かとなった.

The identification of acid residues in the binding site of the protein was studied in this paper. In this paper, we try to find out the origin of the compound and its molecular structure. The difference between absorption and absorption is that the absorption and absorption are different, and the absorption and absorption are different. A specific chemical modification of the residue of the amino acid residue is present in the binding site of the amino acid residue. The identification of the site is determined by the determination of the amount of water in the sample. As a result, the binding site of the compound is hydrated, and the environment of the compound is close to the water. The binding site of this protein is in the water environment, irreversible, strong, specific, and necessary. In the presence of a variety of agents, the method of hydration is applicable. The result is that the light from the source of the acid is fixed.