Functional characterization of the Plasmodium falciparum sodium/hydrogen ion exchanger and its role in chloroquine resistance

恶性疟原虫钠/氢离子交换剂的功能表征及其在氯喹耐药中的作用

• 批准号: 5259078
• 负责人: Professor Dr. Michael Lanzer
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung Parasitologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1995-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5259078?language=en
• 关键词: Functional; characterization; Plasmodium; falciparum; sodium

Unsere Arbeiten legen nahe, daß Plasmodium falciparum das Malariamedikament Chloroquin aufgrund eines Transport-vermittelten Prozesses aufnimmt und anreichert. Dieser Transportvorgang ist an die Aktivität des Natrium/Wasserstoff-Ionenaustauschers (pfNHE) des Parasiten gekoppelt. Unterschiede in der Chloroquin-Aufnahmekinetik sowie in der NHE-Aktivität korrelieren mit dem Chloroquin-resistenten Phänotyp, gemäß einer genetischen Analyse. Das heißt, entweder der NHE selbst oder ein Faktor, der seine Aktivität moduliert, scheinen in Chloroquin-resistenten Stämmen mutiert zu sein. Um diese Hypothese zu überprüfen, haben wir versucht, den pfNHE zu klonieren, und ein Gen erhalten, das starke Homologien mit eukaryotischen NHEs besitzt. Wir beabsichtigen, die physiologische Funktion dieses Proteins sowie seine Rolle bei der Chloroquinaufnahme und -resistenz zu untersuchen. Hierzu möchten wir NHE-defiziente E.coli und Säugetierzellen komplementieren und das Gen in Xenopus-Ooocyten exprimieren. Weiterhin möchten wir der Frage nachgehen, ob Polymorphismen, die in diesem Gen beobachtet werden, mit der Chloroquinresistenz genetisch gekoppelt sind. Wir beabsichtigen dann mittels Transfektionstechnologie einen Austausch der Allele.

我们的工作人员听说，恶性疟原虫通过氯喹的传播途径加速和抑制疟疾的传播。该运输工具是一种寄生虫钠/水热交换器（pfNHE）。用氯喹抗性表型研究NHE-活化剂中氯喹的增敏动力学，并进行遗传学分析。Das heißt，entweder der NHE selbst or ein Faktor，der seine Aktivität moduliert，scheinen in Chloroquin-resistenten Stämmen mutiert zu sein.在这个假设的基础上，我们已经验证了克隆的NHE，并在一个新的基因组中发现了与真核生物NHE的同源性。我们可以看到，蛋白质的生理功能与氯喹的作用和对氯喹的抗性有关。因此，我们需要在Xenopus-Oooocyten exploreren中使用NHE-defiziente E.coli和Säugetierzellen komplementieren和das Gen。后来我们发现，由于多晶型的缘故，在遗传学上对氯喹耐药的韦尔登中死亡。我们需要一种等位基因的扩增转移技术。