後期発生過程における組織の破壊と再構成のメカニズムの解明

阐明晚期发育过程中组织破坏和重组的机制

• 批准号: 05858106
• 负责人: 大房 健
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05858106/
• 关键词: 後期発生; 両生類変態現象; 変態ホルモン; コラーゲン; コラゲナーゼ; ウシガエル; 遺伝子クローニング; 甲状腺ホルモンリセプター応答配列

1.コラーゲンのcDNAクローニング:組織の維持や機能に重要な役割を果たすコラーゲンの変化を明らかにするprobeとしてウシガエルコラーゲンcDNAのクローニングを行った。最終的にヒトI型及びII型コラーゲンのalpha鎖に相同性の高い2つのクローンを得た。これらをプローブとして用いたRNAブロット解析によりコラーゲンのmRNA量が変態の進行につれて、頭胴部では増加し、尾部では減少していることが判明した。これは甲状腺ホルモン投与により人為的に誘導した変態においても同様であった。また、甲状腺ホルモンと反対に変態抑制作用をもつプロラクチンを投与した個体では、頭胴部・尾部の両方でコラーゲンmRNAは増加していた。これにより甲状腺ホルモンのコラーゲンに対する作用は、頭胴部と尾部でちょうど逆であることが明らかになった。このような事例の遺伝子レベルにおける報告は現在までになされていない。同一のホルモンが部域によって正反対の作用を示す機作の解明が今後の課題となった。2.コラゲナーゼの遺伝子クローニング:cDNAより推定された全てのエクソンを含む断片を得た。得られた断片(約4kbp)及び、その上流域(約2kbp)の塩基配列を決定した。Primer Extension法を用いて、本遺伝子の転写開始点を決定した。本遺伝子の上流域に、Sp1,AP-1結合配列及び、甲状腺ホルモンレセプターが結合し得る配列(Thyroid Hormone-responsive element-like sequence)を見いだした。既報のホ乳類の同族酵素遺伝子の上流域においては、Sp1,AP-1結合コンセンサス配列の記載はあるが、TRE-like配列の記載はなく、ウシガエルコラゲナーゼ遺伝子の1つの特徴といえる。ホ乳類には存在しない発生過程である変態期に、変態を制御する甲状腺ホルモンにより制御を受けるための両生類に特徴的な機能を持った配列である可能性が示唆される。

1. cDNA library: important for tissue maintenance and function. The final type I and type II alpha locks are identical, and the final type II alpha locks are identical. The amount of mRNA in the first part of the body increases and the amount of mRNA in the tail decreases. This is the first time I've ever seen a woman. In addition, the expression of mRNA in the thyroid gland was increased in the head and tail of the individual. This is the first time I've ever seen a woman. This report is now available in the form of a case report. The problem of the same domain is solved by the interaction of positive and negative effects. 2. The gene sequence of cDNA was deduced from the complete cDNA sequence. The basic sequence of these two fragments (about 4kbp) and the upper basin (about 2kbp) was determined. Primer Extension method is used to determine the starting point of writing. The Thyroid Hormone-responsive element-like sequence is shown in the upper basin, Sp1,AP-1, and Thyroid Hormone-responsive element-like sequence. It has been reported that the upstream region of the homologous enzyme gene of milk is characterized by the combination of Sp1,AP-1 and TRE-like gene sequences. The possibility of maintaining the functions of the reproductive characteristics of the thyroid gland during the development of the thyroid gland is demonstrated.

项目成果

K.Oofusa: "Regionally and hormonally regulated expression of genes of collagen and collagenase in the anuran larual skin." International Journal of Developmental Biology. (印刷中). (1994)

K.Oofusa：“无尾蜥蜴皮肤中胶原蛋白和胶原酶基因的区域和激素调节表达”（国际发育生物学杂志）（1994 年）。