脊柱靭帯骨化症患者の成因に関する内分泌学的研究

脊柱韧带骨化病患者病因的内分泌学研究

• 批准号: 06771169
• 负责人: 武者 芳朗
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771169/
• 关键词: 脊柱靭帯骨化症; estrogen receptor; 培養細胞; estrogen親和性

「目的」ヒト脊柱靭帯由来培養細胞を用いて脊柱靭帯骨化症患者と非骨化症患者とのestrogenに対する親和性、及びestrogen刺激に対する応答性の相違につき比較検討した。[対象]患者の了解を得て、手術時に採取した本症患者12例の脊柱靭帯費骨化部(後縦靭帯8例、項靭帯4例)及びcontrolとして非骨化症患者10例の脊柱靭帯(後縦靭帯8例、項靭帯2例)をmaterialとした。[方法]本症患者及びcontrolの摘出脊柱靭帯組織をRPMI-1640 mediumにて継代培養し、3〜5代継代後の細胞を培養脊柱靭帯細胞とした。これらの培養細胞を用いてradioimmuno assay法にて3,17β-estradiolに対するreceptor binding assayを行った。さらにimunoradiometric assay法にて3,17β-estradiol添加刺激に対するBone Gla Protein産生能の変化、及び3,17β-estradiol添加刺激に対する^3H-TDR up takeの変化につき検討した。[結果]receptor binding assayでは,本症患者由来の培養靭帯細胞内にKD値(解離定数)で平均7.3×10^<-12.1>と、control(平均7.3×10^<-9.5>)に比しより低濃度のestradiol下でも反応するhormone receptorの存在が確認された。さらに本症患者由来の培養靭帯細胞は3,17β-estradiol添加刺激によって全例^3H-TdR up takeの増加を認めた。これに対しcontrolの細胞はほぼ不変か、むしろup takeが抑制された症例も見られた。3,17β-estradiol添加刺激によるBone Gla Protein産生能の変化では、controlの培養靭帯細胞はすべて測定限界値(1ng/ml)以下であったのに対し、本症患者由来靭帯細胞の中には極微量ではあるがBone Gla Protein産生の増加を来した症例もあり、controlとは異なるestrogen応答性を示した。[結語]以上の結果から、ヒト脊柱靭帯細胞内にestrogen receptorが存在することが確認され、脊柱靭帯骨化症患者の脊柱靭帯細胞には非骨化症患者に比し、よりestrogenに親和性の高いhormone receptorの存在が知られた。さらにestrogenはreceptorを介して靭帯細胞に直接作用し、細胞レベルでの代謝活性を促進させる可能性が示唆された。

Objective: To compare the affinity and responsiveness of cultured cells derived from spinal ligament between patients with and without spinal ligament ossification. 12 cases of spinal cord ossification (8 cases of posterior cord, 4 cases of cervical cord) and 10 cases of spinal cord ossification (8 cases of posterior cord, 2 cases of cervical cord) were examined at the time of operation. [Methods] The spinal cord tissues extracted from patients with this disease and control were cultured in RPMI-1640 medium, and the cells were cultured in spinal cord cells after 3 ~ 5 passages. The receptor binding assay was performed using the radioimmuno assay. In addition, the immunoradiometric assay was used to investigate the change of Bone Gla Protein production energy in response to the addition of 3,17β-estradiol and the change of 3H-TDR up take in response to the addition of 3,17β-estradiol. [Results] The receptor binding assay confirmed the presence of the hormone receptor in cultured cells from patients with this disease at an average KD of 7.3×10^<-12.1>and control(average 7.3×10^<-9.5>). The origin of this disease is recognized by the increase of 3,17β-estradiol in cultured cells. The control cells were not able to control the disease. 3,17β-estradiol stimulation of Bone Gla Protein production can change, control and culture of tough cells measured below the threshold value (1ng/ml), patients with this disease from tough cells in the amount of dust, increase Bone Gla Protein production, disease cases, control and different estrogen response. [Conclusion] The results above confirm the existence of estrogen receptor in spinal cord cells of patients with spinal cord ossification and the existence of hormone receptor with high affinity in spinal cord cells of patients with spinal cord ossification compared with patients with non-ossification. The possibility of direct action of estrogen receptor on cells and promotion of metabolic activity of cells was demonstrated.