着床前遺伝子診断に関する検討-性別診断の精度向上をめざして-

胚胎植入前遗传学诊断研究-旨在提高性别诊断的准确性-

• 批准号: 06771346
• 负责人: 中村 佐知子
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771346/
• 关键词: 着床前遺伝子診断; PCR; 蛍光in situ hybridization

目的:着床前遺伝子診断における性別判断の精度向上への検討方法:1)Embryo;体外受精で得られた未受精卵、変性卵、余剰受精卵を用いた。尚、受精卵は患者の同意が得られたもののみを用い、extrusion法にて1割球のみをbiopsyし、single cellのみを検体とした。受精卵は凍結保存した。2)PCR法;SRYとalphoidXのprimerを使用し、double nested PCRを行った。amelogenin geneついても同様に施行した。3)FISH法;DYZ1,DYZ3,DXZ1を用いてFISH法を行った。結果:PCR法;SRY,alphoidXを用いたものでは、未受精卵の診断率はすべての検体で124bpが検出され、100%(30/30)であった。変性卵に於ては115bp(Y)、124bp(X)共に検出されたものは33%(5/15)で、124bpのみの検出は66%(10/15)であった。single cellでの診断はSRY,alphoidXで、Xのみの検出90%(9/10)、X,Yの検出は10%(1/10)であった。amelogenin geneでは,Xのみの検出50%(5/10)、X,Y両方の検出率40%(4/10)、X,Y未検出率は10%(1/10)であった。FISH法;スライドへの付着率は約95%であった。洗浄が不十分な偽陽性が2〜3%あることより正診率は90%程度になった。Xのみは46%(7/15)、XYは46%(7/15)であった。今回はXXY、XOは認められなかった。結論:PCR法では診断率約90%であり、SRYのみの場合より診断率は向上したと思われる。FISH法に於ても90%程度であった。今後、性染色体の数の異常を把握する上でも、FISH法の固定を工夫し、着床前遺伝子診断(性別診断)に役立てたい。

Objective: To improve the accuracy of preimplantation Embryo 伝 diagnosis における gender determination <s:1> へ 検 methods :1)Embryo; In vitro fertilization で to obtain られた unfertilized oocytes, modified oocytes and remaining fertilized oocytes を to use で た. Yet, the fertilized egg の は patients agree to が ら れ た も の の み を い, extrusion method に て 1 cut the ball の み を biopsy し, single cell の み を 検 body と し た. Fertilized eggs are た frozen for preservation and た. 2)PCR method; SRYとalphoidX <s:1> primerを uses と, double nested PCRを lines った. amelogenin gene て て て acts in the same way as に for <s:1> た. 3)FISH method; DYZ1,DYZ3,DXZ1を using the を てFISH method を line った. Result :PCR method; SRY, alphoidX を with い た も の で は, unfertilized egg の diagnostic rate は す べ て の 検 body で 124 bp が 検 out さ れ, 100% (30/30) で あ っ た. - eggs に in て は 115 bp (Y), 124 bp (X) に 検 out さ れ た も の は で (5/15), 33% 124 bp の み の 検 out は 66% (10/15) で あ っ た. Single cell で の diagnosis は SRY, alphoidX で, X の み の 検 90% (9/10), X, Y の 検 out は 10% (1/10) で あ っ た. Amelogenin gene で は, X の み の 検 50% (5/10), X, Y struck party の 検 rate was 40% (4/10), X, Y not は 検 rate 10% (1/10) で あ っ た. FISH method Youdaoplaceholder0 スラ ドへ ドへ is paid with a rate of approximately 95%であった. The purification is が not very thorough な false positive が2-3%ある <s:1> とよ <s:1> the rate of regular diagnosis is 90% degree になった. X み み 46%(7/15), XY み 46%(7/15)であった. This time, められな XXY, XO recognize められな った. Conclusion: The diagnostic rate of the PCR method is approximately 90% at で であ and み. In the case of であ であ and SRY み, the diagnostic rate of よ <e:1> is expected to increase by <s:1> たと and われる. The FISH method に to て に 90% degree であった. In the future, abnormal <s:1> number <e:1> of sex chromosomes を should be controlled on する で <e:1>, the FISH method <s:1> fixation を time should be increased, and preimplantation genetic 伝 diagnosis (sex diagnosis)に should be established on てた てた.