単純ヘルペスウィルスの硝子体内接種における細胞性免疫に関する研究

1.実験方法雄C3H/Heマウス(6週齢)の左眼角膜を乱切してHSVを接種(HSV群)し、接種後、1、3、5、7、10、14、21、28日目に脾臓および左の頚部リンパ節を摘出した。それぞれの組織から単核細胞を分離し、蛍光色素で標識したモノクローナル抗体と表面抗原を反応させ、フローサイトメトリーを用いて細胞構成を検討した。検討した表面抗原はαβTCR、CD4、CD8、CD11b、CD45R/B220である。培養液のみを接種したマウス(コントロール群)も同様の検討をした。未処置のマウス(未処置群)については、HSV群およびコントロール群と週齢数をあわせて1、7、14、21、28日目に脾臓および左の頚部リンパ節を摘出してフローサイトメトリーを用いて細胞構成を検討した。2.実験結果1)角膜の上皮病変は、角膜接種後7日目以内にHSV群およびコントロール群ともに治癒した。2)脾臓では、HSV群は未処置群に比べて3日目から5日目まではCD4およびCD8の割合は減少し、CD45R/B220の割合は増加していた。コントロール群は未処置群に比べて3日目から5日目まではCD4およびCD8の割合は増加し、CD45R/B220の割合は減少していた。7日目以降には三者の間で有意差はなかった。3)頚部リンパ節では、HSV群は未処置群に比べて3日目から28日目まではCD4は減少し、CD45R/B220の割合は増加していた。CD8の割合は未処置群に比べて3日目から5日目まで減少していた。コントロール群は未処置群に比べて3日目から5日目まではCD4およびCD8の割合は増加し、CD45R/B220の割合は減少していた。CD45R/220を表面抗原に持つB細胞が増加し、HSV感染からの回復に重要な役割を果たしていると思われた。3.今後の見通し1994年度のin vitroのリンパ球サブセット解析に引き続き、リンパ球混合培養後のin vivoでのリンパ球サブセット解析を行う予定である。

1.実験方法雄C3H/Heマウス(6週齢)の左眼角膜を乱切してHSVを接種(HSV群)し、接種後、1、3、5、7、10、14、21、28日目に脾臓および左の頚部リンパ節を摘出した。それぞれの組織から単核細胞を分離し、蛍光色素で標識したモノクローナル抗体と表面抗原を反応させ、フローサイトメトリーを用いて細胞構成を検討した。検討した表面抗原はαβTCR、CD4、CD8、CD11b、CD45R/B220である。培養液のみを接種したマウス(コントロール群)も同様の検討をした。未処置のマウス(未処置群)については、HSV群およびコントロール群と週齢数をあわせて1、7、14、21、28日目に脾臓および左の頚部リンパ節を摘出してフローサイトメトリーを用いて細胞構成を検討した。2.実験結果1)角膜の上皮病変は、角膜接種後7日目以内にHSV群およびコントロール群ともに治癒した。2)脾臓では、HSV群は未処置群に比べて3日目から5日目まではCD4およびCD8の割合は減少し、CD45R/B220の割合は増加していた。コントロール群は未処置群に比べて3日目から5日目まではCD4およびCD8の割合は増加し、CD45R/B220の割合は減少していた。7日目以降には三者の間で有意差はなかった。3)頚部リンパ節では、HSV群は未処置群に比べて3日目から28日目まではCD4は減少し、CD45R/B220の割合は増加していた。CD8の割合は未処置群に比べて3日目から5日目まで減少していた。コントロール群は未処置群に比べて3日目から5日目まではCD4およびCD8の割合は増加し、CD45R/B220の割合は減少していた。CD45R/220を表面抗原に持つB細胞が増加し、HSV感染からの回復に重要な役割を果たしていると思われた。3.今後の見通し1994年度のin vitroのリンパ球サブセット解析に引き続き、リンパ球混合培養後のin vivoでのリンパ球サブセット解析を行う予定である。