培養網膜色素上皮細胞におけるサイクリックGMP依存性塩素イオン輸送

(1)白色家兎の網膜色素上皮(RPE)の細胞内塩素イオン濃度([C1^-]_1)は、81mMと高値を示し、レセプターを介して細胞内サイクリックGMP濃度([cGMP]_1)を上昇させる心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP・10^<-10>M)、一酸化窒素(N0)を化学的に遊離して[cGMP]_1を上昇させるニトロプルシド(3×10^<-3>M)は、RPEの[C1^-]_1を上昇させた。(2)ANPとニトロプルシドによる反応は、グアニル酸シクラーゼの阻害薬であるLY83583(10^<-5>M)、cGMP依存性プロテインキネ-ゼの阻害薬であるKT5823(10^<-6>M)、Na^+/K^+/2Cl^-共輸送体による塩素イオン取り込みの阻害薬であるブメタニド(5×10^<-5>M)により抑制された。また細胞内でcGMPを生成する、8-Br-cGMPは、RPEの[C1^-]_1を持続的に増加させた。(3)ANP、ニトロプルシドは、[cGMP]_1を上昇させ、これらの上昇作用はLY83583により抑制された。以上の結果より、ANP,NOはRPEのグアニル酸シクラーゼを活性化し、細胞内サイクリックGMP濃度の上昇を引き起こし、さらにサイクリックGMP依存性プロテインキナーゼによる何らかの蛋白の燐酸化を介してNa^+/K^+/2Cl^-共輸送体を活性化することで、細胞内塩素イオン濃度を上昇させることが示唆された。

(1)白色家兎の網膜色素上皮(RPE)の細胞内塩素イオン濃度([C1^-]_1)は、81mMと高値を示し、レセプターを介して細胞内サイクリックGMP濃度([cGMP]_1)を上昇させる心房性ナトリウム利尿ペプチド(ANP・10^<-10>M)、一酸化窒素(N0)を化学的に遊離して[cGMP]_1を上昇させるニトロプルシド(3×10^<-3>M)は、RPEの[C1^-]_1を上昇させた。(2)ANPとニトロプルシドによる反応は、グアニル酸シクラーゼの阻害薬であるLY83583(10^<-5>M)、cGMP依存性プロテインキネ-ゼの阻害薬であるKT5823(10^<-6>M)、Na^+/K^+/2Cl^-共輸送体による塩素イオン取り込みの阻害薬であるブメタニド(5×10^<-5>M)により抑制された。また細胞内でcGMPを生成する、8-Br-cGMPは、RPEの[C1^-]_1を持続的に増加させた。(3)ANP、ニトロプルシドは、[cGMP]_1を上昇させ、これらの上昇作用はLY83583により抑制された。以上の結果より、ANP,NOはRPEのグアニル酸シクラーゼを活性化し、細胞内サイクリックGMP濃度の上昇を引き起こし、さらにサイクリックGMP依存性プロテインキナーゼによる何らかの蛋白の燐酸化を介してNa^+/K^+/2Cl^-共輸送体を活性化することで、細胞内塩素イオン濃度を上昇させることが示唆された。