温度感受性人工細胞外マトリックスによるヒト歯胚由来細胞の三次元構築

使用温度敏感的人工细胞外基质三维构建人牙胚来源的细胞

• 批准号: 06771923
• 负责人: 林 英司
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771923/
• 关键词: ヒト歯乳頭由来細胞; 温度感受性ポリマー; スフェロイド; レクチン染色

本研究は、in vitroにおける歯の形態形成機構を解析するために温度感受性ポリマーとI型コラーゲンを混和した人工細胞外マトリックスを用いてヒト歯乳頭由来細胞の三次元球状凝集細胞塊(スフェロイド)の形成を試みた。さらに形成されたスフェロイドがより生体に類似した歯胚の器官形成モデルとなりうるかについて組織化学的に検討した。1)ヒト歯乳頭由来細胞の温度感受性ポリマーとI型コラーゲンを混和した人工細胞外マトリックスによるスフェロイドの形成。10%牛胎児血清を含むDMEM培地にて培養している2ないし5代目のヒト歯乳頭由来細胞を温度感受性ポリマーとI型コラーゲンを種々の比率に混和したディッシュ上にまき、37℃、5%CO_2、95%空気中にて3日間培養した。その後、ディッシュ面積あたりの細胞接着率を測定後、下限臨界共溶温度(30℃以下)にもどし、接着した細胞の剥離率を求めた。その結果、3種類の比率で混合した人工細胞外マトリックスにおいてスフェロイドの形成が可能であることが明かとなった。2)ヒト歯乳頭組織と形成されたスフェロイドにおけるレクチン染色による組織化学的検討採取したヒト歯乳頭組織と形成されたスフェロイドについてレクチン染色(WGA、ConA、RCA-1、SBA、DBA、UEA-1、PNA)を行い、光学顕微鏡的に観察した。その結果、ヒト歯乳頭組織はWGA(++)、ConA(+)、RCA-1(+)、SBA(+)、DBA(-)、UEA-1(-)、PNA(-)であった。しかも、この結果は他の患者より採取したヒト歯乳頭組織においても同様な結果を示した。さらに形成されたスフェロイドにおいても同じ結果が示された。本研究により、ヒト歯乳頭由来細胞のスフェロイドを形成することができ、さらに、形成されたスフェロイドが歯乳頭組織に類似したレクチン染色性を示した。また、われわれは既にヒト歯乳頭由来細胞が単層培養系の、ある条件下において石灰化を誘導することを見いだしている(現在、投稿中)。すなわち、ヒト歯乳頭由来細胞がin vitroにおいても石灰化能を維持してことや本研究の結果などから、スフェロイドが生体に類似した歯乳頭組織の器官モデルとなりうる可能性が示唆された。

In this study, the in vitro laboratory analyzed the temperature sensitivity of temperature sensitivity, the temperature sensitivity, type I, temperature sensitivity, temperature sensitivity The histological type is similar to that of organ formation, which is similar to that of histochemistry. 1) the cause of the disease is the temperature sensitivity of the milk, the temperature sensitivity, the type I temperature sensitivity, the artificial extracellular temperature, the temperature sensitivity, the type I temperature sensitivity, the artificial extracellular temperature, the temperature sensitivity, the temperature sensitivity, the temperature sensitivity. 10% bovine fetal serum was incubated with DMEM for 3 days at 37 ℃, 5%CO_2, and 95% air temperature for 3 days. After heating, the cell adhesion rate was determined, the lower limit of eutectic temperature (below 30 ℃) was determined, and then the cell exfoliation rate was calculated. The result of the test, the ratio of the three types, and the mixture of human and extracellular devices. The results of the test, the results of the results, the ratio of the three types and the ratio of the three types are mixed. 2) Lacteal tissue formation and optical microscopical examination were performed in the tissue chemistry of the breast tissue (WGA, ConA, RCA-1, SBA, DBA, UEA-1, PNA). The results showed that WGA (+), ConA (+), RCA-1 (+), SBA (+), DBA (-), UEA-1 (-), PNA (-) were detected. The results showed that the breast tissue samples of other patients were similar to those of other patients. The results of the results show that the results show that the results are the same. In this study, the cause of the disease is that the tissue type of the milk is similar to that of the tissue. The cause of the disease is that there is a problem with the development of the milk system, and that under the condition of calcinization, there is a problem (now, in the contribution). The cause of the disease is that the liming ability of in vitro tissue can be maintained. The results of this study are similar to those of breast tissue tissue.