骨疾患の診断並びに栄養診断に利用する血漿中ビタミンD代謝物の新規定量法の開発研究

研究开发血浆中维生素D代谢物定量新方法用于骨病诊断和营养诊断

• 批准号: 06772171
• 负责人: 竹内 敦子
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kobe Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772171/
• 关键词: ビタミンD; ビタミンD代謝物; 25-hydroxyvitamin D; 1,25-dihydroxyvitamin D; 骨粗鬆症; 代謝性骨疾患; 定量法

1.25-OH-D及び1,25(OH)_2Dの同時定量法の開発血漿中にはビタミンD(D)代謝物の定量を妨害する物質が多量に含まれている。妨害物を除くとともに目的の代謝物を効率良くとらえることが必要である。これまでの定量法では数段階のHPLCによるクリーンアップが必要不可欠であるとされていたが,操作が煩雑で時間がかかるという欠点があった。HPLCをミニカラムに変えることによって,問題点を一挙に解決できることができた。順相あるいは逆相系のミニカラムの条件を検討して,25-OH-Dと1,25(OH)_2Dが分離でき,再現性が高く,効率の良い条件を確立した。次に,すでに報告しているHPLC法を応用して,25-OH-DのD_2系,D_3系の分離定量が可能な最適の条件を確立した。ラジオレセプターアッセイ(RRA)法のレセプターをこれまで使用してきたニワトリ小腸からウシ胸腺由来のものに変えて特異性を上げることによって定量感度を上げて試料量を減らし,1,25(OH)_2D_2,1,25(OH)_2D_3を再現性良く測定できる条件を確立した。栄養診断及び臨床診断への応用(1)健常成人のD栄養状態の診断:健常成人男女ボランティアの血漿中の25-OH-D及び1,25(OH)_2Dの定量を行うとともに血漿カルシウム,リン,PTHなどのカルシウム代謝調節ホルモン濃度を測定して,健常人のD栄養状態を明らかにした。このデータを男女別,年令別,D摂取量別,ライフスタイル別に分けて解析した。(2)ビタミン剤服用によるD栄養状態の改善効果:健常成人及び高齢者のボランティアに総合ビタミン剤(D_2含有)を長期間服用してもらい,25-OH-D及び1,25(OH)_2DのD_2系,D_3系の分離定量をするとともに,カルシウム代謝調節ホルモン濃度を測定して,ビタミン剤服用による効果を調べた。(3)骨疾患をはじめとする種々の病態患者の臨床診断:骨軟化疾患者,骨粗鬆症患者,種々の原因による高カルシウム血症患者,副甲状腺機能亢進症及び低下症の患者血漿中の25-OH-D及び1,25(OH)_2Dを測定して,診断や治療に役立てることができた。

Development of Simultaneous Quantification of 1,25-OH-D and 1,25(OH)_2D in Plasma A good thing is that you're not This quantitative method is a multi-step HPLC method. It is not necessary to operate the HPLC method. It is not necessary to operate the HPLC method. HPLC is the first step in solving the problem. The conditions for the separation of 25-OH-D and 1,25(OH)_2D in the system of forward phase and reverse phase are discussed. The reproducibility is high, and the conditions for the good efficiency are established. The optimum conditions for the separation and quantification of 25-OH-D in D_2 and D_3 systems were established. The quantitative sensitivity of the RRA method was improved by reducing the sample volume, and the conditions for good reproducibility of the RRA method were established. (1) Diagnosis of D-state in healthy adults: Quantification of 25-OH-D and 1,25(OH)_2D in plasma of healthy adults of both sexes, determination of plasma concentrations of PTH and its metabolic regulators, and detection of D-state in healthy adults. This data is divided into male and female, age,D "and color. (2)Effects of long-term administration of 25-OH-D and 1,25(OH)_2D in healthy adults and adults on the improvement of their nutritional status: Determination of the concentration of 25-OH-D and 1,25(OH)_2D in the D_2 system and D_3 system, and regulation of their nutritional status. (3)Clinical diagnosis of bone diseases: osteomalacia, osteoporosis, hyperthyroidism, parathyroidism and hypothyroidism. Determination of 25-OH-D and 1,25(OH)_2D in plasma for diagnosis and treatment.

项目成果

竹内敦子: "ビタミンD_2を含む総合ビタミン剤の4週間連続服用が高齢者のビタミンD栄養状態に及ぼす改善効果" ビタミン. 69. 103-114 (1995)

Atsuko Takeuchi：“连续服用含维生素 D_2 的复合维生素 4 周对老年人维生素 D 营养状况的改善作用”维生素 69. 103-114 (1995)。

竹内敦子: "Effects of Dietary Vitamin D Intake on Plasma Levels of Parathyroid Hormone and Vitamin D Metabolites in Healthy Japanese" Miner.Electrolyte.Metab.21. 1-6 (1995)

Atsuko Takeuchi：“健康日本人膳食维生素 D 摄入量对甲状旁腺激素和维生素 D 代谢物血浆水平的影响”Miner.Electrolyte.Metab.21 (1995)。