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神経突起の伸長および分枝における神経特異タンパク質HPC-1の機能

神经元特异性蛋白 HPC-1 在神经突生长和分支中的功能

基本信息

批准号：
06780657
负责人：
九島洋一
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kyorin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780657/
关键词：
HPC-1 Syntaxin PC12 Exocytosis Digitonin Synapse

项目摘要

神経特異蛋白質であるHPC-1は、その機能としてシナプス小胞のシナプス前膜への融合過程への関与が指摘されていた。しかし、HPC-1がこの過程について促進的に制御しているとする報告し、抑制的に働いているとする報告があり、その機能について明確ではなかった。そこで、神経細胞のモデル細胞であるPC12h細胞を用いて、抗HPC-1抗体による機能阻害実験を行った。PC12h細胞にHPC-1が存在することは、免疫組織化学的染色およびウエスタンブロッティング法により確認した。ところで、HPC-1は細胞内を向いた膜蛋白質であるので、抗体をただ細胞に与えてもその機能を阻害することはできない。そこで、PC12h細胞を、ジギトニンで処理することにより細胞膜に小孔を開けて抗体を細胞内に与え、その後のカルシウム依存性のノルエピネフィリンの放出量を測定した。その結果、抗HPC-1抗体を与えた細胞ではカルシウム依存性のノルエピネフィリンの放出量は増加した。同様の結果は二種の異なるポリクローナル抗体で得られた。また、抗体の濃度を上げるとノルエピネフィリンの放出が減少することがあったが、このような減少は過剰な抗体による非特異的な効果であると考えられた。以前に報告があった、抗HPC-1抗体により開口放出が抑制されたとの結果はこのような非特異的な効果を見ている可能性がある。以上の結果から、HPC-1はカルシウム依存性の開口放出過程において抑制的に働いていることが示唆された。今後、カルシウム流入以後のシナプス小胞の開口放出過程をHPC-1がどのように抑制的に制御しているかを明らかにすることは、シナプス伝達の制御機構を明らかにする上で重要である。また、開口放出以外の膜輸送等に関するHPC-1の機能を明らかにすることは、神経細胞の形態形成の制御機構を明らかにする上で重要であると考えられる。

Special attention is paid to the HPC-1 and the mechanical properties of the small cell membrane, the fusion process and the accusation. The monitoring and control of the reports promoted by the HPC-1 process, the suppression of the reports, and the ability of the machine to clearly verify the performance of the reports. The use of anti-HPC-1 antibodies and anti-HPC-1 antibodies in PC12h cells can hinder the operation of mobile phones. PC12h cell HPC-1 was confirmed by immunohisto-chemical staining and immunocytochemistry. The intracellular targeting of membrane proteins, antibodies, and antigens in the cells of HPC-1 were able to prevent the damage of membrane proteins. The cell membrane was opened and the antibody was detected in the cell membrane. The antibody was detected in the cell. The cell was dependent on the PC12h cell and the cell membrane. The results, anti-HPC-1 antibody and anti-CD8 antibody were significantly higher than those of the control group. The results of the same test showed that the antibodies were not detected in the two strains. There is a significant increase in the number of antibodies, antibodies and antibodies. In the previous report, the anti-HPC-1 antibody test opened the door to suppress the results of the test. The results showed that the results were not specific and the possibility of failure was significant. As a result of the above results, the HPC-1 test results show that the opening of the dependence window shows that it is instigated by the suppression of the process. In the future, after the inflow of the device, the opening of the small cell is released through the process of HPC-1 control. The control system is clear that the control mechanism is aware of the important information on the control mechanism. On the other hand, the equipment, the opening, the film delivery, and so on, the HPC-1 machine can tell you that the control machine is responsible for the important information on the system.