トランスロケーターを指標としたC4植物細胞の機能分化の解析

以易位子为指标分析C4植物细胞的功能分化

• 批准号: 06740595
• 负责人: 谷口 光隆
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06740595/
• 关键词: C4光合成; 2-オキソグルタル酸; リンゴ酸トランスロケーター; キビ; cDNAクローニング; 機能分化; 遺伝子発現; ミトコンドリア; 膜タンパク質

NADーリンゴ酸酵素型C4植物キビでは,維管束鞘細胞のミトコンドリアがC4光合成経路に組み込まれており,ミトコンドリア膜間の高い輸送活性が必要とされる.この活性を維持するための様々なトランスロケーターが維管束鞘細胞ミトコンドリアに存在することが予想されている.本研究ではこのうちの2-オキソグルタル酸/リンゴ酸トランスロケーター(OMT)のcDNAクローニングを行った.コードされるタンパク質は,分子量32,000であり,ウシミトコンドリアのOMTと同一のアミノ酸で45%,類似のアミノ酸も含めると75%の相同性があった.そのハイドロパシー図もウシのものと良く似ており,膜を6回貫通していると予想された.OMTcDNAの一部分を用いて作製した大腸菌組み換えタンパク質に対する抗体は,ミトコンドリアの膜タンパク質と反応し,得られたcDNAがミトコンドリア局在型のOMTであることが示唆された。得られたクローンには介在配列を含むものがあり,スプライシングされないmRNAが蓄積していることがノーザン解析においても認められた.OMTのmRNA蓄積量はcDNA全長をプローブとした場合,葉肉細胞と維管束鞘細胞で同程度であったが,3´非翻訳領域をプローブとした場合は維管束鞘細胞においてのみmRNAが検出されたことから,このcDNAクローンは維管束鞘細胞特異的に発現するOMT遺伝子に由来することが示唆された.また,非光合成器官においては僅かな発現しかみられず,葉の緑化過程において他の光合成酵素遺伝子と類似したパターンで誘導されることから,OMTが光合成機能に関与すると共に,維管束鞘細胞ミトコンドリアの機能分化の一要因である可能性が予想された.さらに,このOMTタンパク質の全長を大腸菌内で大量発現させ,効率的に精製を行う系を確立した.精製したOMTはリポソーム中で再構成し,基質取り込みの速度論的特徴やその特異性について解析した.

NAD, acid enzyme type C4 plant, tube bundle sheath cell cycle, tube bundle sheath cell cycle, C4 photosynthesis pathway, high activity transfer activity between the membranes, the necessary substrate. To maintain the activity of the tube bundle sheath, the cell of the bundle sheath may be affected by the presence of each other. The purpose of this study is to determine whether there is any acid or acid in this study. This study is based on the fact that there is no acid in the cDNA (OMT). The molecular weight, molecular weight and molecular weight were similar. In the first place, there is no difference between the two groups, and the membrane is not as good as it is. It is expected that a part of the OMT cDNA will be used to detect antibodies in the membrane. If you want to use the OMTcDNA as a part of the membrane, you may want to use the OMTcDNAs as a part of the OMT. In order to make sure that the whole length of the cDNA is in the same level as that of the whole cDNA, it is necessary to analyze the total temperature of the whole cDNA in the column containing the whole amount of cDNA, which is the same as that of the tube sheath cell. 3. In the field of overturning, you need to close the bundle sheath cell to ensure that the mRNA is sensitive, and the cDNA is responsible for the origin of the bundle sheath cell characteristic. In non-photosynthetic organs, there is no significant difference in the number of photosynthetic enzymes, but in the process of chemical treatment, the type of photosynthetic enzyme is similar to that of OMT, the photosynthetic mechanism is common with the plant, and the cell of tube bundle sheath is important because of the possibility of differentiation. In recent years, a large number of bacteria have been found in the long-term bacteria, and the effective management system is responsible for the establishment of the system. In this paper, we analyze the characteristics of the speed theory, which is based on the analysis of the characteristics of the speed theory, which is based on the analysis of the characteristics of the speed theory.

项目成果

Taniguchi M.: "Aspartate aminotransferase isozymes in Panicum miliaceum L.,an NAD-malic enzyme-type C4 plant:comparison of enzymatic properties,primary structures,and expression patterns." Archives of Biochemistry and Biophysics. 318(印刷中). (1995)

Taniguchi M.：“Panicum miliaceum L.（一种 NAD-苹果酸酶型 C4 植物）中的天冬氨酸转氨酶同工酶：酶特性、初级结构和表达模式的比较”，《生物化学和生物物理学档案》318（出版中）。 ）