生きている脊椎動物平滑筋細胞におけるミオシン分子構造・軽鎖燐酸化関係定量化の試み

尝试量化活体脊椎动物平滑肌细胞中肌球蛋白分子结构与轻链磷酸化之间的关系

• 批准号: 06770038
• 负责人: 渡辺 賢
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770038/
• 关键词: 脊椎動物平滑筋; 生筋標本; X線回析; ミオシン軽鎖燐酸化

生きている脊椎動物平滑筋細胞では未だ明らかでない、ミオシン軽鎖燐酸化反応によるミオシンフィラメント構造の制御機構の解明に向けて、平滑筋生筋標本の張力・X線回折像ミオシン反射強度・ピロリン酸ポリアクリルアミドゲル電気泳動によるミオシン軽鎖燐酸化量の比較を行うために、(1)双方の測定に適当な試料の検討と、(2)試料環流装置の検討を行った。(1)X線回析実験は、文部省高エネルギー物理学研究所放射光実験施設BL 15Aにて行った。張力を測定しつつ、筋弛緩時・収縮時の二次元X線回析像をイメージングプレート(Fuji)上に記録し、データをコンピュータで解析した。ラット肛門尾骨筋及び、子宮縦走筋から得られる反射は非常に弱く収縮反応も一過性であるので解析が困難であった。一方モルモット盲腸紐の回析像は強度も強く収縮張力も持続性の部分が大きな割合を占めた。更に、本研究代表者が所属している研究室に本補助金で購入した電気泳動装置を用いたミオシン軽鎖燐酸化度測定においても、モルモット盲腸紐では他の標本とは異なり、X線回析実験で用いた標本同様の小標本で検出することが可能であった。すなわち、本研究の遂行にはモルモット盲腸紐を使用することが妥当であると結論した。(2)従来のX線回析用の試料環流装置では瞬時の溶液交換を行うことが難しく、反応停止液によって素早く標本の燐酸化・脱燐酸化反応を停止させることが必要な生筋のミオシン燐酸化測定には不適当であった。そこでX線回析用の試料環流装置を改造して、迅速な溶液交換及び標本の取付け取り外しが容易に行えるように改良した。

Smooth tendon cells of vertebrates, smooth tendon cells, smoky muscle, skeletal acid, oxidative reflux, and sterile The explanation of the control mechanism of the ンフィラメント structure, the tension of the specimen with smooth tendon and the tension of the X-ray folded image, のオシンReflection intensity・Comparison of the amount of acidification of ピロリン acid ポリアクリルアミドゲルelectrophoresis によるミオシン軽黽釐 acidification (1) The measurement of both sides is carried out appropriately and the sample is measured properly. (2) The sample circulation device is used for the measurement. (1) X-ray analysis equipment, Radiation Light Equipment Facility BL 15A, Institute of Physics, Ministry of Education, Culture, Sports, Culture, Sports, Science and Technology. Measurement of tension and two-dimensional X-ray analysis of muscle relaxation and contraction Fuji (Fuji) upper record, Fuji analysis. The anal and coccygeal tendons and uterine tendons have a very weak reflex and are difficult to analyze due to transient contraction reaction. The strength of the cecal button is the same as the strength of the contraction and the tension of the cecum. To update, the laboratory of the laboratory to which the representative of this study belongs has purchased an electrophoresis device with this subsidy and used it to measure the degree of acidification of the electrophoresis system.も, モルモットcaecum button and other specimens are different, and X-ray analysis can be done with small specimens and small specimens. This study was carried out using the cecal button and the conclusion was drawn properly. (2) The sample circulation device used for X-ray reanalysis is used for instantaneous solution exchange and the reaction stop liquid is used. It is necessary to stop the acidification and deacidification of the specimen and to stop the acidification of the specimen. The sample circulation device for X-ray reanalysis has been modified, and the rapid solution exchange and sample removal and transfer have been improved easily and easily.