RNA polymerase IIに対する自己抗体の分子免疫学的性状に関する研究

RNA聚合酶II自身抗体分子免疫学特性研究

• 批准号: 06857034
• 负责人: 平形 道人
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06857034/
• 关键词: 自己免疫疾患; 自己抗原; 抗 RNA polymerase II抗体; エピトープ; 転写因子; 強皮症; 自己抗体

本年度は強皮症に特異的な抗RNA polymerase II(RNAPII)抗体の分子免疫学的性状を遺伝子工学的手法で追究した。【方法】(1)免疫沈降法でRNAP IIサブユニットと反応した抗RNAP II抗体陽性強皮症15例を対象、全身性エリテマトーデス(SLE)、多発性筋炎(PM)、健常人の400例を対照とした。(2)cDNA^<CTD>をpGEX-2Tに組み換え、融合蛋白とし発現、同抗体との反応性を免疫ブロット法で調べた。(3)Adenovirus major late promoterによるRNAP IIに特異的なin vitro transcriptionの反応系に対象症例からの血清IgGを添加し、その抑制活性を調べた。(4)免疫沈降反応に18アミノ酸からなるCTD合成ペプチド{NH_2-(YSPTSPS)_2-YSPT-amide}を添加し、同抗体陽性症例間の反応様式を検討した。【結果】(1)免疫ブロット法で精製220kDaサブユニットを認識した11例全例がCTD融合蛋白と反応した。一方、全身性エリテマトーデス、多発性筋炎患者、健常人からの対照血清は同蛋白と反応しなかった。(2)抗RNAP II抗体陽性例血清IgGは、RNAP II特異的転写活性を抑制したが、対照血清IgGはしなかった。(3)11例中8例(5例で完全、3例で部分的)に免疫沈降反応の抑制が認められた。【結語】RNAP II-220kDaサブユニットCTDを構成する反復配列が抗RNAP II抗体の主要抗原エピトープで、強皮症における自己免疫現象の標的として重要なことが示唆された。

This year, molecular immunological characterization of sclerosis-specific anti-RNA polymerase II(RNAPII) antibodies and genetic engineering approaches were investigated. [Methods](1) Immunoprecipitation method was used to detect 15 cases of scleroderma, systemic sclerosis (SLE), polycystic tendonitis (PM) and 400 healthy individuals. (2)cDNA^<CTD>pGEX-2T gene expression, fusion protein development, anti-antibody and anti-immune regulation (3)Adenovirus major late promoter can modulate RNAP II-specific in vitro transcription and anti-viral system in response to symptoms, serum IgG addition and inhibition activity. (4)The anti-CTD synthesis of anti-CD18 antibody was studied by adding NH_2-(YSPTSPS)_2-YSPT-amide to the anti-CD18 antibody. [Results](1) 11 cases of CTD fusion protein were identified by purification of CTD fusion protein by immunoblotting method. A prescription, systemic, multiple tendonitis patients, healthy people, anti-serum anti-protein (2)Anti-RNAP II antibody positive serum IgG and RNAP II specific activity were inhibited, and anti-RNAP II antibody positive serum IgG was inhibited. (3)11 In 8 cases (5 cases completely, 3 cases partially), the inhibition of immune sedimentation was recognized. [Conclusion] RNAP II-220kDa protein is a major antigen of anti-RNAP II antibody and an important marker of autoimmune phenomena in scleroderma.

项目成果

平形道人: medicina. 31. 612-614 (1994)

平田道人：医学。31. 612-614 (1994)

平形道人: medicina. 31. 612-614 (1994)抗Jo-1抗体およびその他の抗アミノアシルtRNA合成酵素抗体

Michito Hiragata：医学。 31. 612-614 (1994) 抗 Jo-1 抗体和其他抗氨酰基-tRNA 合成酶抗体。