BCG-Cytokine fusion Proteinによる膀胱癌治療

BCG-细胞因子融合蛋白治疗膀胱癌

• 批准号: 06857109
• 负责人: 沖 守
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06857109/

本研究課題におけるin vivoの抗腫瘍効果判定系として、我々はFisher344ラットを用い、発癌物質であるN-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamineを飲水中に混ずることで、ほぼ100%のラットにおける膀胱腫瘍の発癌に成功した。一連の実験に用いるBCGとして、比較的入手の容易な東京株を用い(日本BCG製造)、実験に必要な量まで増菌を行った。次に本研究課題において購入した超音波ホモジナイザー(US-150T型)を用いて増菌したBCGをsonicationし、電気泳動にて検討を行った。この段階において、sonicationを行う際の使用するBCGの菌量、sonicationの条件(超音波処理の時間、超音波の強度等)について、基礎的データを収集した。電気泳動の結果より、sonicationにて得られるBCG fragmentの分子量を検討し、すでに報告されているパスツール株などをsonicationして得らたデータなどとの比較検討を行い、これらの株と東京株において大きな差異のないことを確認した。次に電気泳動により得られた各バンドを切り出し、各々に含まれるBCG由来の蛋白の濃度を定量、ロードしたBCGの量と比較し、高い回収率を得た。現在、これら各バンドより抽出した蛋白を抗原とし、ヒト末梢血リンパ球を用い、トリチウムチミジンの取り込みを指標としたproliferation assayを行い、電気泳動より得られた各分画の抗原性に関して検討を行い、最も抗原性が高いと思われる分画を同定中である。

In this study, we evaluated the effect of anti-tumor in vivo by Fisher344 and found that N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine, a carcinogenic substance, was 100% successful in bladder cancer development when mixed with drinking water. A series of BCG and BCG products are available. It is easy to start using Tokyo BCG (produced in Japan). It is necessary to increase the number of bacteria. The second research topic is to purchase ultrasonic wave (US-150T type), improve BCG sonification and electrophoresis. The stage, sonication, BCG bacteria count, sonication conditions (ultrasonic treatment time, ultrasonic intensity, etc.), and basic sonication conditions are collected. The molecular weight of the BCG fragment was determined by sonication. The concentration of BCG-derived protein in each sample was quantified, the amount of BCG was compared, and the recovery rate was high. Now, the antigenicity of each component is determined by the measurement of the antigenicity of each component.