薬用植物における有用物質生産の制御に関する遺伝子ネットワークの解明

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重要生薬当帰の基原植物であるトウキ(Angelica acutiloba Kitagawa)とホッカイトウキ(A.acutiloba var.sugiyamae Hikino)の遺伝的関係を明らかにするために、ゲノムDNAを鋳型として10merの短いオリゴヌクレオチドをプライマーとするPCRによってDNA増幅を行い、得られるRandom amplified polymorphic DNA(RAPD)のパターンを解析した。さらに、市場品生薬のDNA分析に応用するために乾燥根についてもRAPD解析を行い乾燥方法の影響について検討した。奈良県にて栽培されているトウキ(大深当帰)および北海道にて栽培されている2系統のホッカイトウキの各数個体について、凍結および凍結乾燥した葉より全DNAを個別に抽出し、この約10ngを鋳型として6種の10merプライマーを用いてPCRによるDNA増幅を行った。RAPDパターンを比較して遺伝的相違度を算出し、さらにこの値を平均距離法により結合して系統樹を作成した。その結果、個体間でRAPDパターンに相違がみられたが、種内における個体間の遺伝的相違度は、種間の相違度より小さいものであった。大深当帰の根を室温乾燥、凍結乾燥、および50-60℃の温湯での処理(湯もみ処理)後に室温乾燥し、それぞれから抽出した全DNAについてRAPD解析を行った。抽出されたDNAの収量には差があったが、すべてのDNAにおいてPCRによるDNAの増幅がみられ、乾燥生薬のDNA分析の可能性が示唆された。