リコンビナントヒト骨成長因子の歯根膜細胞に対する影響について

重组人骨生长因子对牙周膜细胞的影响

• 批准号: 07771735
• 负责人: 杉山 榮一
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771735/
• 关键词: BMP; 細胞培養; 歯根膜細胞

本年度は、矯正的理由による便宜抜去時に得た成人ヒト抜去歯より得たヒト歯根膜細胞を培養し、その継代3代目の細胞すなわち、継代数の少ない細胞を用いて、同細胞に対してヒトリコンビナントBMP-2を500ng/mlという高濃度で一週間作用させ、その影響を見たところ以下の結果を得た。1)アルカリフォスファターゼ活性:ヒトリコンビナントBMP-2を500ng/mlという高濃度で1週間作用させもアルカリフォスファターゼ活性の上昇は認められなかった。コントロールとして用いたST-2細胞では10ng/mlのヒトリコンビナントBMP-2でも活性が認められ、100ng/mlでは作用させなかった場合の10培程度の上昇が認められた。2)オステオカルシンの遺伝子発現:RT-PCR法を用いてヒト歯根膜細胞のオステオカルシンの遺伝子発現を調べたところやはり500ng/mlのヒトリコンビナントBMP-2を作用させてもその発現量を増加させることはなかった。なおノーザンブロット法を用いた結果では遺伝子発現は認められなかった。これはアッセイ法の感度の違いによるものと思われる。3)PTHrecaptorの遺伝子発現:RT-PCR法を用いてヒト歯根膜細胞のオステオカルシンの遺伝子発現を調べたところ500ng/mlのヒトリコンビナントBMP-2を作用させてもその発現量は認められなかった。またPTHによるcyclicAMPの上昇も認められなかった。4)オステオポンチンの遺伝子発現:ノーザンプロット法を用いてヒト歯根膜細胞のオステオポンチンの遺伝子発現を調べたところ500ng/mlのヒトリコンビナントBMP-2を作用させてもその発現量は認められなかった。5)I型コラーゲンの遺伝子発現量:ノーザンブロット法を用いて調べたところ500ng/mlのヒトリコンビナントBMP-2を作用させてもその発現量を増加させることはなかった。

This year, the reason for correction was that adult root membrane cells were cultured at low concentrations, and the effects of high concentrations of BMP-2 at 500ng/ml were observed. 1) High concentration BMP-2 500 ng/ml, 1 week effect, high activity BMP-2 500ng/ml, high activity BMP-2 500 ng/ml. The activity of BMP-2 in ST-2 cells increased at 10ng/ml and 100ng/ml respectively. 2) Detection of the gene expression in the root membrane cells:RT-PCR was used to modulate the gene expression in the root membrane cells. The effect of BMP-2 on the gene expression in the root membrane cells was increased by 500ng/ml. The result of the application of the method is that it is impossible to find out the answer to the question. This is the first time I've ever seen a woman. 3) PTHreceptor gene expression:RT-PCR method was used to regulate the gene expression of PTHreceptor in root membrane cells. The effect of BMP-2 on PTHreceptor gene expression was 500ng/ml. The cycle of PTH and AMP rises and falls. 4) The expression of protein in root membrane cells was modulated by using the method of protein synthesis. The expression of protein in root membrane cells was determined by the method of protein synthesis. 5) The amount of type I C-protein released: 500ng/ml of C-protein released by BMP-2 was increased by using the method of protein release.