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鳥類の頚髄に起こる細胞死の機序の解明

阐明禽类颈脊髓中发生的细胞死亡机制

基本信息

批准号：
07780671
负责人：
八木沼洋行
金额：
$ 0.64万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780671/
关键词：
プログラム細胞死アポトーシス運動神経ニワトリ発生脊髄

项目摘要

本研究では、孵卵4-5日のニワトリ胚頚髄におこる神経細胞死の発生機序について細胞レベルや分子レベルで解明するために以下の3つの目標に向かって並行して研究を進めた。(1)細胞死と細胞分化や細胞周期との関係を明らかにすること。^3Hチミジンを用いたオートラジオグラフィー法やBrdUを用いた免疫組織化学法を用いて細胞死を起こしている細胞、細胞死を起こさないで生き残る細胞の最終分裂の時期を調べたところ、細胞死を起こす細胞はおおむね孵卵2.5から3.5日の間に最終分裂を終えているのにたいして、細胞死を起こさない細胞は孵卵2.5から4.5日の間に最終分裂を行っていることが明らかとなり、最終分裂の時期が細胞死を起こす細胞の決定に関与している可能性が示唆された。また、細胞死を起こす細胞は、S期を離れて少なくとも12時間以上経った細胞であることが明らかになった。(2)細胞死に関与すると思われる細胞死関連分子の発現細胞死関連分子の発現を免疫組織化学法を用いて調べた。細胞死関連抗原とされるapogenとengulfenの発現を調べたところ、頚髄における細胞死においてもその発現が見られ、頚髄における細胞死でも他の部位に起る細胞死において見られる分子と共通の分子の発現があることが確認された。また、細胞死を起こす分子として知られるインターロイキン1β転換酵素(ICE)の阻害剤を用いた実験を行ったところ、頚髄の細胞死は抑制されなかった。これに対して腰髄において孵卵6-10日に起る細胞死はICE阻害剤によって抑制された。この結果は頚髄の細胞死と腰髄の細胞死とでは細胞内機序に違いがある可能性を示唆している。(3)外植体を用いた器官培養系の確立細胞死の開始直前のニワトリ胚の頚部をやく300μm程度の切片にして、コラーゲンゲル中で培養し、12から24時間後に切片を固定し組織学的な検討を加えた。この結果、外植体中では、顕著な細胞死が起らなかった。しかしながら、培養条件下での細胞の代謝などの評価はまだ行っておらず、この結果の解釈は今後の課題となっている。

In this study, the embryos were incubated for 4-5 days. The mechanism of cell death, the sequence of cell death, the molecular structure of cell death, the molecular structure and the molecular structure of cell death were studied in the following 3 years to carry out further research. (1) Cell death, cell differentiation, cell cycle, cell cycle and cell cycle. Using immunohisto-chemical method, we used the method of immuno-histochemistry to determine the number of cells in which the cells died, the cells died, and the cells died. The most recent mitosis occurred in the most recent period of cell division. The eggs were incubated for 2.5 days and 3.5 days, respectively. After the death of the cells, the eggs were incubated for 2.5 days and 4.5 days after the birth of the eggs. During the period of death and death of the cells, the possibility of determining the number of cells and the possibility of cell death at the time of cell death and the possibility of cell death at the time of cell death and the possibility of cell death at the time of cell death were not affected. When cell death starts, cell death starts, cell death starts (2) Immunohistochemical method was used to detect the molecular weight of cell death. Cell death, antigen, apogen engulfen, cell death, cell death Cell death, cell death. The eggs were incubated from 6 to 10 days after incubation. The cells died, ICE blocked the eggs, and inhibited the eggs. The results showed that the possibility of cell death, cell death, cellular death, cellular death, cellular (3) the explants were used to make sure that the explants were killed by tissue culture. The embryos were cut at 300 μ m before the initiation of cell death. The explants were cut into sections at the level of 300 μ m, and the explants were incubated at 12 and 24 hours later. The results showed that the cells in the explants died and began to suffer from death. Under the conditions of health care and training, we will not be able to do anything on our behalf, and the results will help us to solve the problem in the future.