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充填層型リアクターを用いるハイブリッド型人工肝臓の開発

使用填充床反应器开发混合人工肝

基本信息

批准号：
07780769
负责人：
柳健一
金额：
$ 0.64万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

【緒論】現在肝移植が唯一の救命手段となっている重症の肝不全に対する治療の切り札として、装置内に生体の肝組織を組み込んだ、ハイブリッド型人工肝臓の開発が活発になされている。ハイフリッド型人工肝臓の開発のためには、肝細胞の高密度大量培養法の開発がその鍵となるが、研究代表者は多孔質の樹脂である、polyvinyl formal(PVF)樹脂多孔質体を用いる肝細胞の高密度培養法について報告してきた。本研究では、PVF樹脂を担体とする充填層型リアクターを用いて肝細胞の連続培養を行い、アルブミン分泌能を評価した。【実験方法】肝細胞はWistar系雄性ラットからコラゲナーゼ灌流法にて遊離した。平均孔径250μmのPVF樹脂を2x2x2mmに細切して細胞固定化のための担体とした。担体500個をリアクター内に充填して充填層型リアクターとした。細胞播種後、9日間の灌流培養を行い、培地中のアルブミン濃度をELISA法により測定した。【結果】培地に牛胎児血清を加えた群では、培養期間中、肝細胞のアルブミン分泌能は低下することなく、高いレベルを維持した。一方、血清を加えない培地を用いた群では、培養開始後、アルブミン分泌能は急速に低下し、9日後では開始直後の10%程度となった。培地にcpidermal growth factorを加えた群では、培養開始4日程度は血清添加群とほぼ同様のアルブミン分泌能を示したが、9日後では開始直後の20%程度まで低下した。【結論】PVF樹脂を用いる充填層型リアクターにより、肝細胞のアルブミン分泌能を9日にわたって維持可能であった。長期間の肝細胞のアルブミン分泌能の維持には血清の添加を必要とした。

【緒論】現在肝移植が唯一の救命手段となっている重症の肝不全に対する治療の切り札として、装置内に生体の肝組織を組み込んだ、ハイブリッド型人工肝臓の開発が活発になされている。聚乙烯醇缩甲醛（PVF）多孔聚合体用聚乙烯醇缩甲醛（PVF）高密度聚乙烯醇缩甲醛（PVF）多孔聚合体用聚乙烯醇缩甲醛（PVF）高密度聚乙烯醇缩甲醛（PVF）多孔聚合体用聚乙烯醇缩甲醛（PVF）高密度聚乙烯醇缩甲醛（PVF）多孔聚合体用聚乙烯醇缩甲醛（PVF）高密度聚乙烯醇缩甲醛（PVF）多孔聚合体。本研究探讨了PVF脂质体脂质体充注型胶原酶利用胶原蛋白肝细胞负迁移能力的变化，以及胶原蛋白肝细胞负迁移能力的变化。[阻碍方法]肝细胞移植Wistar系恶性肿瘤的发生和发展。平均粒径250μm聚乙烯吡咯烷酮（PVF）树脂均为2x2x2mm无菌切粒成型细胞固定化细胞载体。担体500個をリアクター内に充填して充填層型リアクターとした。细胞扩散试验，9日荧光检测流动性进行试验，地中微量白蛋白定量ELISA法检测要求确定。【結果】培地に牛胎児血清を加えた群では、培養期間中、肝細胞のアルブミン分泌能は低下することなく、高いレベルを維持した。一方，血清加赤霉素低剂量地使用赤霉素群，赤霉素起始浓度，赤霉素分散能力迅速下降，9日赤霉素起始浓度直降10%。陆地爬行动物的表皮生长因子添加量为20%，哺乳动物开始4天的低度生长血清添加群中相同的表皮生长因子的分化能表示为100%，9天的低血糖开始时直降20%。[编辑]PVF胶原蛋白补充型胶原蛋白酶抑制剂的应用，肝细胞胶原蛋白酶抑制剂的分离能力，9日的胶原蛋白酶抑制剂的应用，可能会引起过敏。長期間の肝細胞のアルブミン分泌能の維持には血清の添加を必要とした。