乳癌細胞におけるAnnexinIIの発現とその骨転移形成過程における意義

乳腺癌细胞中Annexin II的表达及其在骨转移形成过程中的意义

• 批准号: 07671167
• 负责人: 高橋 俊二
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07671167/
• 关键词: 骨転移; AnnexinII; 乳癌; 破骨細胞; 細胞接着; 骨吸収; 破骨細胞活性化因子; Annexin II

我々はヒト破骨細胞様細胞のcDNAライブラリーから破骨細胞形成を促進する因子としてAnnexinIIを同定した(J.Biol.Chem.269:28696,1994)。AnnexinIIは骨髄細胞からの破骨細胞形成を促進し骨吸収促進作用も示した。一方、従来細胞質内蛋白と考えられていたAnnexinIIがラット乳癌細胞を含む種々の細胞の細胞膜外に発現され、細胞外マトリックス、内皮細胞等への接着に関与していることも明らかになっている。そこで我々は乳癌細胞がAnnexinIIを発現して破骨細胞形成を促進し骨転移病巣の形成を促している可能性を検証するために以下の検討を進めた。1)乳癌細胞株がAnnexinIIを発現することを、mRNAレベル(AnnexinII cDNAによるNorthern blot)及び蛋白レベル(抗AnnexinII抗体によるWestern blot,Flowcytometry)で確認した。2)マウス乳癌細胞とマウス骨髄細胞の共存培養の系を確立し、AnnexinIIの発現と破骨細胞形成促進能の相関の検討を行い、さらにAnnexinIIのsense-,antisense-plasmidを乳癌細胞に導入したサブクローンを確立し、共存培養における破骨細胞形成促進能を検討した。マウス乳癌細胞MMT060562はサイトカイン非存在下で骨髄細胞による破骨細胞形成を促進するが、MMTにAnnexinIIを強発現させた細胞株は有意に強い破骨細胞形成刺激効果を示し、軽度AnnexinIIを抑制した細胞株は、破骨細胞形成促進が弱い傾向があった。更にin vivoでの骨転移形成能の検討を予定している。3)ヒト乳癌の臨床サンプルを集積し、乳癌原発巣でのAnnexinIImRNAの発現を確認し、乳癌原発巣および骨転移巣サンプルでのAnnexinII発現について免疫組織学的検討を行っている。

We identified the same factors as Annexin II in the cDNA translation of osteoclast cells (J. Biol. Chem. 269:28696, 1994). Annexin II promotes osteoclast formation and bone resorption. The expression of protein in cytoplasm of breast cancer cells is closely related to the expression of protein in cytoplasm of breast cancer cells. The following are some of the findings of this study. 1)Annexin II expression in breast cancer cell lines was confirmed by Western blot,Flowcytometry, and Western blot. 2) Establishment of a culture system for breast cancer cells and osteoclast cells, development of Annexin II and study of osteoclast formation promoting activity. Breast cancer cell line MMT060562 has a strong tendency to stimulate osteoclast formation in the absence of osteoclast, while MMT Annexin II has a strong tendency to inhibit osteoclast formation in the absence of osteoclast. In addition, the bone migration formation in vivo can be discussed in detail. 3) Immunohistologic study of the accumulation of clinical features of breast cancer, identification of Annexin II mRNA expression in breast cancer development, and Annexin II expression in breast cancer development and bone metastasis.

项目成果

Shunji Takahashi 他: "Downregulation of Calcitonin Receptor in RNA Expression by Calcitonin during Human Osteoclast-like Cell Differentiation." Journal of Clinical Investigation. 95. 167-171 (1995)

Shunji Takahashi 等人：“人类破骨细胞样细胞分化过程中降钙素受体对 RNA 表达的下调”。临床研究杂志 95. 167-171 (1995)。

Shunji Takahashi他: "Development and Characterization of a Human Marrow Stromal Cell Line that Enhance Osteoclast-like Cell Formatin" Endocrinology. 136. 1441-1449 (1995)

Shunji Takahashi 等人：“增强破骨细胞样细胞形成的人骨髓基质细胞系的开发和表征”内分泌学 136. 1441-1449 (1995)

M.Koizumi, S.Takahashi他: "Bone Metabolic Markers in bone netastasis" J.Cancer Res.and Clinical Oncol.121. 542-548 (1995)

M.Koizumi、S.Takahashi 等人：“骨转移中的骨代谢标志物”J.Cancer Res.and Clinical Oncol.121 (1995)。