膵臓癌における肝転移機構の解析：膵癌の産生する細胞解離因子の解明

胰腺癌肝转移机制分析：胰腺癌产生的细胞解离因子的阐明

• 批准号: 07671409
• 负责人: 江上 寛
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 1996
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07671409/
• 关键词: 膵臓癌; 肝転移; 細胞解離因子; BOP; ハムスター

私たちは、N-nitrosobis(2-oxopropyl)amine(BOP)誘導実験膵癌組織から、浸潤性、肝転移率の異なる二つの細胞株、高転移株(PC-1・0)、低転移株(PC-1)を樹立し、高転移株培養上清中に低転移株の細胞コロニーを解離させる因子(癌細胞解離因子:DF)が存在することを見いだし、本因子の精製と膵癌の浸潤、転移機構との関連について解析を進めた。In vitroにおいてPC-1細胞は常にコロニーを形成して増殖するが、本因子を添加するとPC-1細胞の細胞コロニーは濃度依存的に解離した。Time lapse videoあるいは金コロイド法を用いた細胞運動能計測の結果、PC-1細胞の細胞運動能は本因子添加により著明に増加し、同時にNothern blot analysisを用いて既知のoncogeneの発現変化を検索した結果、PC-1細胞のc-fos oncogeneの発現が一過性に増強した。この変化はPC-1細胞における細胞運動の経時的変化とよく相関し、細胞運動の増強はstaurosporine,cyclic AMP antagonistあるいは c-fos antisense oligonucleotideによって抑制された。また、本因子は細胞外マトリックス分子の内、PC-1細胞のファイブロネクチンに対する細胞接着を選択的に増強させた。さらに、マトリゲルをcoatしたBoyden chamberを用いて細胞浸潤能を検索した結果、本因子添加によりPC-1細胞のマトリゲルに対する細胞浸潤能が有意に増強した。PC-1・0培養上清より分離精製した因子に対する中和抗体(ポリクローナル:マウスIgG)を作製しwestern blotを行った結果、分子量約20万および約10万前後に3本のmajor bandが検出された。これらの結果から高浸潤・転移性の膵癌細胞が産生する本因子の作用が癌の浸潤・転移機構と密接に関連していることが示唆された。

N-nitrosobis(2-oxopropyl)amine(BOP)-induced cancer tissue, invasiveness, liver migration rate, high-transplantation cell line (PC-1・0), low-transplantation cell line (PC-1) ), the cell dissociation factor (cancer cell dissociation factor: DF ) exists, the factor is refined, the cancer is infiltrated, and the migration mechanism is related, and the analysis is performed. In vitro growth and proliferation of PC-1 cells has been achieved, and the addition of this factor has led to concentration-dependent dissociation of PC-1 cells. Time lapse videoあるいは金コロイド法をいたcell motility measurement results, PC-1 cells' cell motility factor addition, and the same time as Nothern blot The results of the analysis were the known oncogene changes and the PC-1 cells oncogene were transiently enhanced.この変化はPC-1 cells におけるChange of cell movement とよくrelatedし、Cell movement の増Strengthはstaurosporine, cyclic AMP antagonist あるいは c-fos antisense oligonucleotide is used to inhibit the use of oligonucleotide.また, this factor is inside the extracellular molecule, and the のファイブロネクチンに対する cell of PC-1 cells is selected.さらに、マトリゲルをcoatしたBoyden As a result, the cell infiltration ability of PC-1 cells was increased by adding this factor to the chamber. The PC-1・0 culture supernatant was isolated and purified, and the neutralizing antibody of the factor に対する (ポリクローナル:マウスIgG) was produced by しwestern The result of blot is about 200,000, and the molecular weight is about 100,000. The molecular weight is about 100,000. The result of this factor is that the production of highly invasive and metastatic cancer cells is related to the role of this factor in the infiltration and migration mechanism of cancer and the close connection between them.

项目成果

Egami H.et al.: "Characterization of cancer cell dissociation factor in a highly inursive pancreatic cancer cell line." Cancer. 75. 1554-1561 (1995)

Egami H.等人：“高度侵袭性胰腺癌细胞系中癌细胞解离因子的表征。”

江上 寛: "膵癌転移の機序と制御-新しい知見-「膵癌由来の細胞解離因子」" 胆と膵. 16. 401-405 (1995)

Hiroshi Egami：“胰腺癌转移的机制和控制 - 新发现 - 源自胰腺癌的细胞解离因子” Bile and Pancreas 16. 401-405 (1995)。