ホルモンによる卵成熟誘起の分子機構に関する研究

激素诱导卵母细胞成熟的分子机制研究

• 批准号: 07740637
• 负责人: 平井 俊朗
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Teikyo University of Science & Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07740637/
• 关键词: 卵成熟; 卵成熟促進因子(MPF); 卵成熟誘起ホルモン(MIH); プロテインキナーゼ

ホルモンによる魚類卵成熟誘起分子機構を明らかにする目的で、これまでにその中核をなす卵成熟促進因子(MPF)がサイクリンBとcdc2キナーゼの複合体であることを証明した。本研究では卵成熟誘起への他のプロテインキナーゼの関与を調べ、以下の結果を得た。サイクリンAはサイクリンBと同様、体細胞分裂においてcdk(サイクリン依存性キナーゼ)と複合体を形成し、その活性を調節することで細胞周期を制御することが知られている。しかし、サイクリンAの卵成熟(減数分裂)における挙動や機能については知見が無い。そこで大腸菌により生産したキンギョ組換えサイクリンAタンパク質を抗原としてモノクローナル抗体を作製し、卵成熟過程におけるこの分子の挙動を解析した。サイクリンAはMPFの構成分子であるサイクリンBとは異なり、未成熟卵中にすでに存在しており、卵の付活に伴って消失した。また、cdc2キナーゼとは複合体を形成するが、cdk2キナーゼとは複合体を形成していないことが明らかとなった。卵成熟誘起ホルモン(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one)によって卵核胞崩壊(GVBD)が誘起されるのに伴って、MPF(サイクリンB-cdc2複合体)が活性化されることが知られている。これに対してサイクリンA-cdc2複合体のキナーゼ活性はGVBDが完了するまではわずかに上昇するのみで、その後減数第一分裂の完了後に急激に上昇した。一方、以前キンギョ成熟卵cDNAライブラリーから単離した、生殖腺に特異的に発現している数種の未知のキナーゼcDNAについては、完全長のクローンを単離し、これらの遺伝子に対する組換えタンパク質を生産し、特異抗体を得ることができた。現在、これらを用いて生化学的な解析を行っている。

It is proved that the nuclear egg maturation promoting factor (MPF) is a complex of Serikrin B and cdc2 ー, which has the purpose of clearly defining the molecular mechanism that induces fish egg maturation in the air. In this study, we obtained the following results: The cell cycle is regulated by complex formation and activity regulation. The egg matures (meiosis), and the function of the egg matures (meiosis). The production of E. coli and the analysis of molecular movements during egg maturation are also discussed. The constituent molecules of MPF are different, exist in immature eggs, and disappear in eggs. Cdc2 The egg maturation induced by the 17α, 20 β-dihydroxy-4-pregnen-3-one protein (GVBD) was induced by the 17α, 20 β-dihydroxy-4-pregnen-3-one protein (GVBD), and the MPF was activated by the 17 α, 20 β-dihydroxy-4-pregnen-3-one protein (GVBD). The activity of the A-cdc2 complex increases rapidly after the completion of the first meiosis. In one aspect, mature egg cDNA was isolated, gonad-specific cDNA was detected, several unknown cDNA species were isolated, complete cDNA was isolated, and the cDNA was associated with the production of specific antibodies. Now, the analysis of biochemistry can be used in the field of chemistry.

项目成果

Katsu Y. et al.: "Molecular cloning and immunological analysis of goldfish cyclin A during......" Develpmental Biology. 170. 616-625 (1995)

Katsu Y. 等人：“金鱼细胞周期蛋白 A 的分子克隆和免疫学分析......”发育生物学。