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品種特異的エリシターに対するダイズ植物のレセプターの分離およびその遺伝子の単離

大豆植物品种特异性诱导子受体的分离及其基因的分离

基本信息

批准号：
07760044
负责人：
竹内洋二
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

植物は受容体(レセプター)を介して病原体由来の抵抗反応誘導物質(エリシター)を認識することにより抵抗反応を誘導すると考えられている。Pseudomonas syringae pv.tomatoから単離された非病原性遺伝子avrDは、抵抗性遺伝子Rpg4を持つダイズ品種に対してのみ特異的に抵抗反応を誘導するエリシター・シリンゴライドの生成に関与している。本研究においては、品種・レースの特異性の分子機構を解明するため品種特異的エリシター・シリンゴライドに対するダイズのレセプターの精製およびその遺伝子のクローニングを目指した。avrDを持つ大腸菌を【^<14>C】グルコースを含む液体培地で培養し、培養濾液から高速液体クロマトグラフィーなどにより【^<14>C】でラベルしたシリンゴライドを精製した。それを用いて抵抗性ダイズ品種植物より調製した細胞膜分画との結合実験を行った結果、シリンゴライドに対する特異的結合部位は認められなかった。そこで可溶性分画を用いて結合実験を行ったところ、シリンゴライドに特異的に結合する部位が存在することが明らかとなった。この結合はエリシター活性のないシリンゴライド類似体によっては阻害されなかったが、シリンゴライドおよびエリシター活性のある類似体によって阻害され、結合部位は抵抗反応に役割を担うレセプターであると考えられる。また可溶性分画を蛋白分解酵素で前処理することにより結合活性が消失し、シリンゴライドレセプターは蛋白質であることが示唆された。このように本研究により品種特異的エリシター・シリンゴライドに対するレセプターの存在が、世界で初めて示唆された。目的としたレセプターの精製およびその遺伝子のクローニングには至らなかったが、それに向けての基盤が確立できた。

Plant receptors are involved in the identification of resistance inducers from pathogens. Pseudomonas syringae pv.tomato is isolated from non-pathogenic genes avrD and resistant genes Rpg4, which are related to the generation of disease-specific resistant genes. In this study, we aim to understand the specific molecular structure of the species, the refinement of the species 'sites and the cloning of the public genes associated with the species-specific Erisita-Sislintaglide. avrD is <14>used to cultivate coliform bacteria in liquid culture medium, culture filtrate, high-speed liquid culture medium, and purification <14>medium. The results of cell membrane analysis and binding of resistant plant species are as follows: The soluble protein binding site is present in the protein binding site. The binding site of the compound is resistant to reverse cleavage. Soluble protein breakdown enzymes are pre-processed, and binding activity is lost. This study is aimed at variety-specific research and development, and the world's first research. The goal is to refine and improve the quality of the products.