酵母細胞質性線状プラスミドの核移行とそれに伴うテロメア付着・Ty挿入の解析

酵母细胞质线性质粒的核转位及相关端粒附着和 Ty 插入分析

• 批准号: 07760106
• 负责人: 福田 耕才
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Sojo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07760106/
• 关键词: linear plasmid; killer plasmid; pGKL plasmid; Ty; migration; cytoplasm; transfer

本研究ではS. cerevisiaeを宿主としてpGKL1に細胞質でのみ発現するLEU2遺伝子(細胞質性マーカー)と、核内でのみ発現するURA3遺伝子(核性マーカー)を挿入した細胞質性プラスミドpCLU1の核移行を解析した。pCLU1が核に移行後、末端蛋白質の代りに宿主のテロメアが付着した線状のpTLU1、またpTLU1にTyが挿入しLEU2遺伝子が発現した3クローン(pTLU1-E1, -E2, -E3)を解析した。申請時に計画したI-VIIのテーマについて実績を報告する。I:Tyの挿入位置を塩基配列のレベルで解析した結果、pTLU1-E1, pTLU1-E2,におけるTyの挿入位置は、各々LEU2遺伝子の上流21bp、159bpであった。pTLU1-E3については現在解析中である。II:Tyの挿入位置とLEU2遺伝子発現の促進(1倍体)・抑制(2倍体)を転写レベルで解析した結果、生育速度と転写量は比例関係にあったが、さらに定量的に解析中である。III:pTLU1におけるテロメア付着部位及びpRLU1タイプの環状プラスミドのJOINT部分を塩基配列レベルで解析するためにクローニングを試みているが立体障害のためかまだ成功していない。IV:pTLU1に挿入したTyの塩基配列を部分的に決定した。V:培養条件、菌株での移行頻度及び移行による構造変化を解析する。用いた炭素源によって移行頻度にかなりの違いが認められ、移行の認められなかった炭素源もあった。また移行頻度は生育速度におおよそ比例しており、2倍体の方が1倍体よりも頻度が高かった。VI:移行の頻度の異なる変異株はまだ得られていない。VI:K. lactis移行の認められない変異株の変異が1遺伝子によるものであるか、優勢であるか否かについて解析中である。特にVI、VIIの問題は細胞内における核酸の移動が、単なる拡散によるものか、能動的なものであるか否か、能動的どあればどの様な遺伝子が、如何にしてそれを支配しているかを知る手がかりになるものと考え、他の問題とともに興味深く解析していきたい。

In this study, the host of S. cerevisiae, the host, the pGKL1, the cell, the cell, the LEU2, the URA3, the nucleus, the cell, the pCLU1. After the pCLU1 nucleus migrates, the terminal protein transplants the host protein (pTLU1-E1,-E2,-E3) into the LEU2 gene (pTLU1-E1,-E2,-E3) in the form of pTLU1, pTLU1 and Ty. At the time of application, you should always plan to prepare I-VII reports and reports. The I:Ty input location is based on the analysis of the results, pTLU1-E1, pTLU1-E2, Ty entry location, upstream 21bp of each LEU2 location, and 159bp data analysis. PTLU1-E3 is currently in the process of parsing. The results of the analysis of the results of the analysis of the results, the growth rate, the proportion of the amount of writing, and the quantitative analysis of the results of the analysis of the results, the results of the analysis of the results, the proportion of the growth rate, and the quantitative analysis of the growth rate were analyzed in terms of the promotion (1 ploid) and inhibition (2 ploid) of II:Ty. In the case of III:pTLU1, the location of the equipment and the part of the JOINT of the environmental protection unit (pRLU1) are required to be parsed in order to determine the accuracy of the equipment. IV:pTLU1 enter the decision button in the Ty Base column section. V: culture conditions, the degree of migration of the strain and the degree of migration. Use the carbon source to move the carbon source and transfer the carbon source to the carbon source. Growth rate, growth rate, proportion, diploid, 1-ploid, 1-ploid, high-grade. VI: transfer temperature, temperature and temperature. VI:K. Lactis is in the process of parsing in the process of analysis. Special VI, VII questions: nucleic acid transfer in the cell, dispersion in the cell, activity in the cell, activity in the cell, the control of the device, the monitoring of the phone, the analysis of the data and the analysis of the problem.

项目成果

Norio Gunge: "Migration of the Yeast Linear Plasmid from the Cytoplasm into the nucleus in Saccharomyces cerevisiae" Current Genetics. 28. 280-288 (1995)

Norio Gunge：“酿酒酵母中酵母线性质粒从细胞质迁移到细胞核”《当代遗传学》。