血管内皮細胞における線維芽細胞増殖因子の貯蔵および放出機構の解明

阐明血管内皮细胞中成纤维细胞生长因子的储存和释放机制

• 批准号: 07770022
• 负责人: 土肥 良秋
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770022/
• 关键词: ヒト臍帯静脈; 血管内皮細胞; Weibel-palade小体; 線維芽細胞増殖因子; compound48; 80; 免疫細胞化学

本年度の研究実施計画に沿って(1)Weibel-Palade(WP)小体が増加している満期産ヒト臍帯静脈を材料として線維芽細胞増殖因子(fibroblast growth factor : FGF)のうち血管内皮細胞において産生されるbasic FGF(b-FGF)の免疫局在の解析を行った。同血管をZamboni液で固定後、アルコール脱水、LowicrylK4M包埋し、超薄切片上で抗ヒトb-FGF抗体を一次抗体に用いた免疫金法を施行した。その結果、b-FGF免疫陽性金粒子は内皮細胞の細胞膜とWP小体に局在性を示した。また、粗面小胞体にも微弱ながらb-FGF免疫陽性反応を示した。これらの結果から、b-FGFは内皮細胞で産生された後、WP小体に貯蔵されることが明らかとなったが、細胞膜への局在性から、血漿中のb-FGFを内皮細胞が取り込んでいる可能性もあり、その解明は今後の課題である。(2)b-FGFの産生・放出を促進する腫瘍壊死因子とトロンビンの添加によるb-FGFの免疫局在の変動の解析はb-FGF抗原性の問題から研究実施計画(1)で用いた固定・包埋法による形態保持が不良のため、明確な成果を得るまでに至っておらず、現在、解析を急いでいる。(3)WP小体の脱顆粒を誘発するcompound48/80添加によるb-FGFの免疫局在の変化に関する解析を行った。その結果、WP小体は著明な脱顆粒像と開口分泌による内容物の管腔側および基底側への細胞外放出像を示し、b-FGF免疫陽性金粒子はこれらの形態変化を示したWP小体限界膜やその近傍の細胞質および細胞外に放出された内容物に局在し、b-FGFの細胞外放出過程がWP小体の挙動に連動することが明らかとなった。今後、研究実施計画(2)の解析を急ぐとともに、b-FGFの安定化に関与するヘパラン硫酸の内皮細胞における局在も検索する予定である。

の research be applied this year plan に along っ て (1) Weibel - Palade (WP) corpuscle が raised plus し て い る against period production ヒ ト umbilical 帯 vein を material と し て line d bud cells raised colonization factor (fibroblast growth factor: FGF) の う ち endothelial cells に お い て produce さ れ る basic FGF (b - FGF) の immune bureau on line analytical を の っ た. With vascular を Zamboni liquid after で fixed, ア ル コ ー ル dehydration, LowicrylK4M で ヒ resistance on embedding し, ultrathin sectioning ト b - antibody に FGF antibody を once with い た immune gold method to execute し を た. Youdaoplaceholder0 そ results, b-FGF immunopositive gold particles そ endothelial cell <s:1> cell membrane とWP bodies に localization を showed た た. Youdaoplaceholder0, rough-faced small cell に また weak ながらb-FGF immunopositive reverse 応を shows た. こ れ ら の results か ら, b FGF で は endothelial cells produce さ れ た, WP corpuscle に storage 蔵 さ れ る こ と が Ming ら か と な っ た が, cell membrane へ の bureau in the sexual か ら, plasma が の - b FGF を in endothelial cells take り 込 ん で い る possibility も あ り, そ の interpret は の topics in future で あ る. (2) - b FGF の production, release を stimulates す る swollen sores 壊 death factor と ト ロ ン ビ ン の add に よ る - b FGF の immune bureau in の - dynamic analytical は - b FGF の antigenicity の problem か ら research plan (1) be applied で with い た fixation, embedding method に よ る bad form to keep が の た め, clear な results を る ま で に to っ て お ら ず, now Analysis: を urgent を で る る. (3) the WP corpuscle の degranulation を 発 lure す る compound48/80 add に よ る - b FGF の immune bureau in の variations change に masato す る parsing line を っ た. そ の results, は zhao Ming な degranulation of WP body like と openings secretion に よ る contents の lumen side お よ び basal side へ の extracellular release like を し, b - FGF immune positive gold particles は こ れ ら の morphology variations を shown し た WP corpuscle limit membrane や そ の nearly alongside の cytoplasm お よ び extracellular に release さ れ た contents in し に bureau, b - FGF の outside the cell Release process: がWP small body: 挙 movement: に linkage: する ら とが light: ら ら となった. Future research be applied project, (2) analytical を の urgent ぐ と と も に, b FGF の stabilization に masato and す る ヘ パ ラ ン sulfate の endothelial cells に お け る bureau in も 検 cable す る designated で あ る.

项目成果

Yoshiaki Doi: "The increase in number of Weibel-Palade bodies and the endothelin-1 release from endothelial cells in the cadmium-treated rat thoracic aorta" Virchows Archives. (in press). (1996)

Yoshiaki Doi：“镉处理的大鼠胸主动脉中 Weibel-Palade 小体数量的增加和内皮细胞内皮细胞 1 的释放” Virchows 档案。

Yoshiaki Doi: "Histamine release from Weibel-Palade bodies of toad aortas induced by endothelin-1 and sarafotoxin" Anatomical Record. 242. 374-382 (1995)

Yoshiaki Doi：“由内皮素-1 和 sarafotoxin 诱导的蟾蜍主动脉 Weibel-Palade 体释放组胺”解剖记录。

Kunshige Hamasaki: "The contraction of small arteries in the perimetrium by presurgical medication with the luteinizing hormone-releasing hormone agonist to patients with leiomyomas : An electron and immunoelectron microscopy" Fukuoka Acta Medica. 86. 389

Kunshige Hamasaki：“子宫肌瘤患者使用黄体生成素释放激素激动剂进行术前药物治疗后，周膜小动脉的收缩：电子和免疫电子显微镜检查”《福冈医学学报》。