パルヴォウイルスを使った染色体における特異的遺伝子の組換え技術の開発

利用细小病毒开发染色体中特定基因的重组技术

• 批准号: 07770088
• 负责人: 橋中 一也
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: 宮崎医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770088/
• 关键词: 遺伝子組換え; 染色体; パルヴォウイルス

ヒトパルヴォウイルスB19ゲノム由来の単鎖DNAベクターの構築とそれを用いた染色体上での遺伝子組換えを計画した。まず最初に、ヒト培養細胞核内で安定に自律増殖可能なベクターを構築する目的で、B19ゲノムの両端に存在するパリンドローム構造領域のサブクローニングを試みた。Dr.J.D.Tratschin(Institut fur Viruskrankheiten und Immunoprophylaxe,Switzerland)より供与されたB19ゲノムDNAクローンpVD1,2,8,10(Tratschin,et al.Virology 175,247-254,1990)を鋳型としてPCR(polymerase chain reaction)法によりパリンドローム構造領域の増幅を行った。しかし、増幅されたDNAには、塩基配列から推定される大きさの分子は検出できなかった。そこで、パリンドローム構造内に存在するいくつかの制限酵素部位を利用して複数の断片に分断後、サブクローニングすることにした。しかし、pVD1,2,8,10のDNAは、塩基配列から存在すると考えられる制限酵素で切断されず、パリンドローム構造の大部分に欠失変異が認められた。今後は、欠失領域部分を合成オリゴヌクレオチドによって補い、完全なパリンドロームを再構成してベクターの構築しようと考えている。また、一般に使用されている大腸菌では、完全なパリンドロームを安定に維持できない可能性もあるので、SURE株の使用等も検討したい。

The reason for this is that you need to use the sub-tissue of the DNA gene on the chromosome to draw a picture. In the first place, the stable and self-regulated colonization of the nucleus may be induced in the first place and in the first place, and there may be some problems in the end of the B19 cell. The Dr.J.D.Tratschin (Institut fur Viruskrankheiten und Immunoprophylaxe,Switzerland) system is available in conjunction with the Tratschin,et al.Virology (Tratschin,et al.Virology 175247-254) PCR (polymerase chain reaction) method for the production of field data in the field. The data, the frame, the DNA, the base arrangement, the presumption, the molecular, the molecular. After the enzyme-limiting parts were cut off by the use of complex fragments, the enzyme-limiting parts were cut off. There are some problems in the production of enzymes, such as pVD1,2,8,10, pVD1,2,8,10, and Glycyrrhizin. In the future, if there is a lack of territory, you will find that there is a problem in the field, and that you will not be able to do so in the future. In general, the use of antifungal bacteria, the use of SURE strains, the use of anti-bacterial strains, the use of microorganisms, and so on.