大腸上皮性悪性腫瘍におけるEpstein-Barr Virusの感染性について

EB病毒在结直肠上皮恶性肿瘤中的感染性研究

• 批准号: 07770138
• 负责人: 伊藤 裕啓
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770138/
• 关键词: 大腸上皮性腫瘍; Epstein-Barr Virus

生検およびポリペクトミ-で得られた正常粘膜5例、中等度異型腺腫20例(腺管腺腫9例、腺管絨毛腺腫11例)、腺癌13例(高分化5例、中分化7例、低分化1例)を用いて大腸上皮性腫瘍におけるEpstein-Barr Virus(EBV)の感染性について検索した。初めに、ホルマリン固定・パラフィン含理した標本を用い、in situ hibridization法によってEBV-EBERの発現の有無を調べた。次に同じ標本を用いてタンパク除去後、フェノール・クロロホルム法およびエタノール沈殿を行なってDNAを抽出し、PCR法を用いてEBVのnuclear antigen geneであるEBNA-1領域を増幅した。結果はin situ hybridizationによる検索では今回行った症例中には、腫瘍細胞には明らかな陽性所見は得られなかった。また、PCR法を用いた検索も、現在まだ進行中であるが、今のところ明らかな腫瘍細胞へのEBVの感染を示唆するような所見は得られていない。尚、PCR法を用いたEBV遺伝子の検索は、現在のところPCRで増幅した遺伝子を2%のアガロースゲルで電気泳動し、エチジウムブロマイドを用いて紫外線下での観察のみであり、EBNA-1のinternal probeを用いたSouthern hybridizationによる検索はすべての症例に行われておらず、現在進行中である。また、EBVのLatent Menbrane Protein-1に対する抗体(EBV,LMP-1,clone:CS1-4,Dako)を用いてABC法で免疫染色を行ったが陽性細胞は見られなかった。現在までは、大腸上皮性腫瘍には明らかなEBVの感染は見られなかったが、最近リンパ球浸潤の強い低分化腺癌にEBVの感染が認められた1例報告があり、今後は症例数をもっと増やして検索していきたいと思う。

Among them, 5 cases were normal mucosa, 20 cases were moderate atypical adenomas (9 ductal adenomas, 11 ductal villous adenomas), 13 cases were adenocarcinoma (5 well differentiated, 7 moderately differentiated, 1 poorly differentiated). The EBV-EBER development is regulated by the method of initial suppression and in situ suppression. The EBNA-1 domain was amplified by PCR and DNA was extracted by DNA extraction. In this case, the tumor cells were found to be positive. The PCR method is used to detect EBV infection in tumor cells. The detection of EBV gene by PCR is currently underway, with PCR amplification increasing to 2% of EBV gene. The detection of EBV gene by PCR is currently underway, with EBNA-1 internal probe and Southern hybridization. Antibodies against EBV and Latent Menbrane Protein-1 (EBV,LMP-1,clone: CS1 -4,Dako) were detected by ABC method. EBV infection in epithelial tumors of the large intestine has recently been reported in one case, and the number of cases in the future has increased.