シトクロームb558大サブユニット遺伝子の転写調節機構の解析

细胞色素b558大亚基基因转录调控机制分析

• 批准号: 07770154
• 负责人: 熊取 厚志
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770154/
• 关键词: シトクロムb558; 遺伝子発現; 転写開始点

1.オリゴ・キャップ置換法によるシトクロームb558大サブユニット遺伝子転写開始点の確定。健常人より単離した顆粒球及び単核球より得られたポリ(A)^+mRNAを用いてオリゴ・キャップ置換法にて完全鎖長のシトクロームb558大サブユニットmRNAの5'末端をクローニングしその塩基配列より、(1)これまでに提唱されてきたシトクロームb558大サブユニット遺伝子の転写開始点はプライマーエクステンション法のみによって決定されたものであり確定的ではなかったが、本研究によりその位置も確かに転写開始点である事を明らかにした。(2)上記の位置よりさらに5'上流に存在する少なくとも6ヶ所の新たな転写開始点を確定し、本遺伝子が単一の転写開始点を有する通常のTATAボックス型遺伝子ではない事を初めて示した。(3)研究で得られた転写開始点が先に得られたRNaseプロテクションアッセイの結果と一致している事から、RNaseプロテクションアッセイのみでは推定の域を越えなかった各転写開始点の使用頻度の差や細胞種差が明確となった。2.シトクロームb558大サブユニット遺伝子のプロモーター領域の単離と遺伝子発現調節部位の解析。上記の結果によりシトクロームb558大サブユニット遺伝子のプロモーター領域は翻訳開始点の十数塩基上流から始まっている事が明らかとなったので、翻訳開始点から5'上流約5キロベースの範囲でさまざま欠失を持つミュータント遺伝子を作成した。そして、それらの転写調節活性を前骨髄性白血病細胞(HL60)を用いて解析し、現在までのところ転写促進に必要であると考えられる部位を1カ所同定した。

1. Please ensure that the starting point of writing is confirmed in b558. Normal people do not have to pay attention to the number of particles and nuclear balls. (a) ^ + mRNA uses the method to improve the overall performance of the device b558. In the end of the mRNA, the system is based on the number of computers. (1) in this study, please make sure that the starting point is correct and the starting point is correct. (1) in this study, it is necessary to make sure that the starting point is correct. (2) at the upper level, there is a confirmation of the new starting point for writing in the previous location, and the starting point for writing in this system is not available. There is a general TATA warning type on the starting point for writing in this system. (3) according to the results of the study, it is found that the starting point of RNase reading is correct, and the results are consistent with each other. The results are consistent, and the domain is presumed to be correct at each starting point of writing. The error cell error is clearly verified at each writing starting point. two。 This is the first time for the analysis of the location of the visible parts of the field. The previous results show that the number of users in the field is more than ten in the field, the starting point is more than ten, and the upstream data range of the starting point and the starting point is about 5%. The results show that it is not possible to maintain the starting point. The active promyelocytic leukemic cells (HL60) were analyzed and analyzed. Now, it is necessary to test the site of the disease.