M鎖含有ラミニンの肝臓における発現制御と肝細胞機能に対する影響について

肝脏中M链层粘连蛋白的表达调控及其对肝细胞功能的影响

• 批准号: 07770369
• 负责人: 水田 敏彦
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770369/
• 关键词: Laminin; Merosin; 肝再生; 急性障害肝; サイトカイン

1、M鎖を含むLaminin (Merosin)の肝臓での発現ラット肝切除による再生肝および四塩化炭素による急性傷害肝モデルにおいて、免疫組織化学的に12-24時間後に肝実質細胞にmerosinの強い発現が認められ、以後漸減した。また、ヒトの急性肝炎組織においても、肝細胞に同様の強い発現がみられた。次にラット肝臓よりコラゲナーゼ還流、percoll密度勾配法にて肝実質細胞、伊東細胞、内皮細胞を分離培養し、それぞれの細胞を免疫染色してみると、いずれの細胞にも発現が認められたが、肝実質細胞にIL-1β、TNFα、TGFβ等のサイトカインを加えると、IL-1β、TNFαにより培養液中のmerosinの増加がみられた。2、M鎖を含むLaminin (Merosin)の肝細胞接着、増殖に対する影響MerosinおよびマウスEHS肉腫由来のlaminin (EHS laminin)を培養皿にコートし、その上に初代肝細胞を培養し、接着能を培養24時間後のMTTassayで、増殖能を経時的なBrdUの取り込み率で検討した。接着能に関しては、merosinはEHS lamininの約1.5倍高く、増殖能も培養3日目まで1.5倍優れていが、その後は有為な差はみられなかった。以上のことから、merosinは従来のlaminin (EHS laminin)と異なり、肝再生や急性肝傷害時に炎症性サイトカインの刺激により主に肝実質細胞から産生、分泌され、それ自身が肝細胞周囲に沈着することにより、肝細胞増殖の初期相に促進的に働いているものと考えられた。今後は遺伝子レベルでのmerosinの発現動態および制御因子の解析を行う予定である。

1. The expression of M-lock protein in liver tissue containing Laminin (Merosin) was detected after hepatectomy. The expression of merosin in liver tissue cells was detected after 12-24 hours of hepatectomy. In acute hepatitis, the liver tissue and liver cells are the same. In addition, liver stromal cells, Ito cells and endothelial cells were isolated and cultured by Percoll density matching method. Immunostaining was used to detect the presence of IL-1β, TNFα and TGFβ in liver stromal cells. IL-1β and TNFα increased in culture medium. 2. M-lock containing Laminin (Merosin) affects the proliferation of hepatocytes. Merosin and laminin (EHS laminin) are the origin of EHS. Primary hepatocytes are cultured in culture and then cultured for 24 hours. Then, the merosin and EHS laminin were about 1.5 times higher, and the propagation ability was 1.5 times higher after 3 days of cultivation. The above mentioned factors include laminin (EHS laminin), liver regeneration and inflammatory cell stimulation during acute liver injury. They are mainly responsible for the production, secretion, and self-development of hepatocyte peripheral deposition. They are also responsible for the promotion of hepatocyte proliferation in the initial phase. In the future, the development of merosin and the analysis of control factors will be determined.