母乳中生理活性物質のヒト消化管粘膜上皮の増殖、分化に及ぼす生理作用-特にラクトフェリンのCaco-2細胞に対する作用-

母乳中生理活性物质对人体胃肠粘膜上皮增殖和分化的生理作用——尤其是乳铁蛋白对Caco-2细胞的影响——

• 批准号: 07770604
• 负责人: 小口 学
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770604/
• 关键词: 細胞培養; Caco-2細胞; ラクトフェリン; アポトーシス

本年度は、ヒト消化管上皮細胞株であるCaco-2細胞を購入し、細胞培養を開始した。まず、培養条件の再検討を行い、必要最低限の胎仔ウシ血清濃度を決定し(10%)、継代培養の確立を達成した。その後、ラクトフェリンのCaco-2細胞に与える影響の検討を開始した。最初に、その基礎データとなるCaco-2細胞の血清加培養液および無血清培養液下における増殖曲線の作成を行った。そして、これとラクトフェリンを添加した際の状態を比較し、鉄飽和型のラクトフェリンが、細胞増殖に対し、軽度促進的に働くが、一方、鉄不飽和型のラクトフェリンは抑制的に作用すること、そしてこの変化が一定濃度までは容量依存的であることを確認した。次の段階として、Caco-2細胞の増殖過程における形態学的な変化を明らかにするため、経時的に、光学顕微鏡による観察を行った。そして、未分化な状態では、Caco-2細胞の細胞質が扁平であるが、増殖、分化が進行するにつれて、立方円柱上皮様に変化することを確認した。以上のデータを基礎として、現在、ラクトフェリン添加によりCaco-2細胞に何らかの形態学的変化が生じるか否かについて、光顕、電顕レベルにて検討中である。さらに、今後は、鉄不飽和型のラクトフェリンにより細胞増殖が抑制される点について、鉄不飽和型ラクトフェリンがCaco-2細胞に対してnecrosisを起こすのか、apoptosisを誘導するのかについて電顕での観察を行うとともに、DNAの断裂が生じるか否かを蛍光色素を用いる方法によって明らかにすべく準備を進めている。

This year, the cell lines of digestive tract epithelium have been transferred into Caco-2, and the cell culture has begun. The conditions should be adjusted again, and the necessary minimum limit should be set for the determination of the serum concentration of the baby (10%) and the replacement of the baby. After that, the Caco-2 cell line will begin to change with each other. In the first place, the serum culture solution was used to determine the growth curve of Caco-2 cells in serum-free medium. This is the first time to add information about the effect of inhibition in terms of status, size, and type, cell proliferation, degree-promoted growth, one-party, and type-specific suppression. In the secondary phase, the Caco-2 cell colonization process, the chemical analysis of the morphology, the current phase, and the optical micrometer are used to observe the operation. The cells of Caco-2, undifferentiated, undifferentiated, flat, colonized, differentiated, and cuboidal columnar epithelium were identified. The above information is related to the basic information, the current, and so on. In the future, and in the future, the cell colonization was not allowed in the cell of the Caco-2, the cell of the cell, the necrosis, the cell, the apoptosis, the cell, the cell. DNA is used to determine the content of light pigments. the method is used to verify that the system is ready for further treatment.