三次元培養下におけるブタ胎児ラ島成熟と膵管上皮細胞の関与

三维培养中胎儿猪胰岛的成熟及胰腺导管上皮细胞的参与

• 批准号: 07770964
• 负责人: 野尻 卓也
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770964/
• 关键词: ラ島細胞; 膵管上皮細胞; 三次元培養

ラ島が長期に機能を維持するために必要な条件のひとつとして,膵管上皮細胞のラ島栄養効果の検討を試みた。まず,本実験に先立って,胎児・新生児・成熟ブタの3種類を対象として,ラ島と膵管上皮細胞の採取条件を模索した。実験1:初めに,新生仔ブタよりコラゲナーゼ消化法によりpureなラ島と,また別個に膵管上皮細胞を各々得ることに成功した。これらを1群:ラ島,2群:膵管上皮細胞,3群:ラ島-膵管上皮細胞混合にわけて各々分取し,アガロース-コラーゲンゲルを用いた三次元培養を行った。液体培地として10%FBS添加RPMI1640を使用し,長期培養を試みた。結果,膵管上皮細胞の入ったゲルではゲルの融解がおきてしまい2週間以上の三次元培養は不可能であった。線維芽細胞の増殖が原因と思われたが,さらに線維芽細胞の増殖抑制下に培養を行うことについて検討中である。実験2:次に膵管上皮細胞そのものは潜在的には胎児膵においてラ島への分化成熟に関与する割合が大きいだろうという推測の元に,胎児ラ島と成熟ブタラ島の混合培養に関する実験を行った。ブタ胎児からはコラゲナーゼを用いた振盪消化法によりラ島を採取した。液体培地での培養を追加することで純度を高めることができた。成熟ブタからは女子医大大河原等の方法に基づいた機械的消化法によりラ島を得た。1群:胎児ラ島,2群:成熟ラ島,3群:胎児-成熟ラ島混合とし,各々分取し,三次元培養とした。4週間の培養を行い,経時的に,培地およびゲル内のタンパク量,シンスリン,アミラーゼ,及び膵管上皮細胞の活動性の指標としての炭酸脱水酵素の定量を現在測定中である。

The necessary conditions for long-term maintenance of the function of the epithelial cells are discussed. The three types of fetal, neonatal and mature epithelial cells are related to each other, and the conditions for the selection of epithelial cells in the ductal epithelium are discussed. 1: The first time, the newborn baby was born, the digestive method was pure, and the epithelial cells of the other ducts were successfully obtained. Group 1: island, Group 2: duct epithelial cells, Group 3: island-duct epithelial cells mixed with each other. 10% FBS added to liquid culture medium RPMI1640 was used for long-term culture. As a result, it was impossible to culture the epithelial cells in three dimensional culture for more than 2 weeks. The reasons for the proliferation of line bud cells are discussed. 2. The development of the secondary epithelial cells in vitro is related to the differentiation and maturation of fetal cells and fetal cells. The method of oscillation digestion is used in the process of digestion. The liquid culture medium is added, and the purity is high. Mature women's medicine big river original and other methods of digestion based on the mechanical method of digestion Group 1: fetal island, Group 2: mature island, Group 3: fetal-mature island mixed, each separated, three dimensional culture During 4 weeks of culture, the amount of carbon dioxide in the culture medium, the amount of carbon dioxide, the amount of carbon dioxide, and the activity index of the epithelial cells of the tubule were measured.