ヒト尿路における一酸化窒素合成酵素のアイソザイムの同定とその局在に関する研究

人体泌尿道一氧化氮合酶同工酶的鉴定及定位研究

• 批准号: 07771291
• 负责人: 小原 健司
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771291/
• 关键词: 一酸化窒素合成酵素; 尿路平滑筋

平滑筋弛緩作用に対する一酸化窒素の関与については、血管平滑筋領域で解明が進んでいる。L-アルギニン由来の一酸化窒素は、内皮細胞由来弛緩因子として、また非アドレナリン非コリン作動性神経のメディエーターとして血管平滑筋弛緩作用を有する。泌尿器科領域においても尿道平滑筋、陰茎海綿体において一酸化窒素合成酵素(NOS)の存在が確認されている。本年度の研究実績として、まず尿管平滑筋組織内の一酸化窒素合成酵素陽性神経の存在をnicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADPH)diaphorase染色、anti-brain-NOS特異的抗体を用い免疫組織染色にて確認した。また、生理実験として尿管平滑筋のmuscle stripsを用いKrebs-Henseleit液中での経壁的電気刺激に対する収縮弛緩反応を調べた。10-^5M guanethidine、2×10-^6Matropine存在下の経壁的電気刺激に対し尿管切片は弛緩反応を示さず、10-^4ML-NGnitrosrginine methylester(NOS inhibitor)、10^2ML-arginine(NO source)の影響も認めなかった。10^4M sodium nitroprusside(NO donor)は電気刺激に関係なく弛緩反応を示した。これより生理実験においては蠕動運動に対するNOの関与は証明されなかった。この結果については、現在投稿中である。次に組織切片よりRNA抽出し、逆転写酵素によりcDNAを合成し、これをNO synthaseのprimerを用いたRT-PCR法にて増幅させることによりその存在を確認するRT-PCR法を尿路の各組織を用い調べた。現在のところ尿路において誘導型NOSは確認されたが神経型NOSは確認されていない。

Smooth muscle relaxation is related to an acidification factor, and the smooth muscle area of blood vessels is explained. L-1- The presence of an acid-producing hormone synthase (NOS) in the urinary tract smooth muscle and corpus cavernosum was confirmed. In this year's study, the presence of an acid synthase positive neuron in smooth urinary tract tissue was confirmed by nicotinamide dinucleotide phosphate(NADPH)diaphorase staining and anti-brain-NOS specific antibody staining. The muscle strips of the smooth urinary tract are modulated by electrical stimulation of the urinary tract wall in the Krebs-Henseleit solution. The effects of 10-^5 M guanethidine and 2×10-^6 Matropine on the relaxation of urinary tract sections, 10-^4 ML-nitrosrginine methylester(NOS inhibitor) and 10^2ML-arginine(NO source) were also observed. 10^4M sodium nitroprusside(NO donor) is an indicator of relaxation in response to electrical stimulation. No, no, no, The result is, now in the submission. Tissue sections, RNA extraction, reverse transcription of enzymes, cDNA synthesis, NO synthase primer amplification, reverse transcription of enzymes, and RT-PCR were used to detect the presence of these enzymes in various tissues of the urinary tract. Now, the urinary tract inducible NOS is confirmed, and the nervous NOS is confirmed.

项目成果

小原健司: "Histochemical evidence of the presence of nitvic oxide synthase in human vreter" The Journal of Vrology. 153. 345A (1995)

Kenji Ohara：“人类 vreter 中存在一氧化氮合酶的组织化学证据”《Vrology 杂志》153. 345A (1995)。