ラット三叉神経節神経細胞培養モデルによる鼻粘膜過敏性の分子生物学的解析

使用大鼠三叉神经节神经元培养模型进行鼻粘膜过敏的分子生物学分析

• 批准号: 07771457
• 负责人: 国米 秀幸
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771457/
• 关键词: 三叉神経節; 神経細胞培養モデル; Histamine H1 receptor; in situ hybridization

本年度の研究実施計画は、1.ラット三叉神経節細胞の培養、2.培養細胞上のHistamine H1 receptorの測定であり、receptorの測定にはreceptor assay法及びnorthern blotting法を予定していたが、Histamine H1 receptorのcDNAが入手できたため、H1receptorのメッセージ変化をin situ hybridization法にて観察し、更にRT-PCR法による定量を試みることとした。実際に研究を進めて見たところ、1.のラット三叉神経節培養は、神経細胞のみの純粋培養ができず、グリア細胞等の支持細胞が混在するため、これらの神経組織全体の反応としてしかreceptorの測定、観察ができないことが判明した。従って同時に三叉神経節自体の培養にても検討していくこととした。2.のヒスタミンH1 receptor測定は、入手したH1 receptorのcDNAがこのままではin situ hybridizationに使用できなかったため、これを改良することに本年度の大半の時間を費やしてしまった。現時点では、やっと作製できたH1 receptor RNA probにてin situ hybridizationをpositive controlのラット中枢神経系に施行し、ほぼ良好な結果を得られたため、ようやくこれから本実験を開始することとなった。従って残念ながら現時点では、予定していた解析の結果はまだ出ておらず、発表等もないが、今後必ずや有益なDataが出せるものと期待している。

This year's research plan includes: 1. culture of trigeminal ganglion cells; 2. determination of Histamine H1 receptor on cultured cells; 3. determination of receptor by receptor assay and northern blotting; 4. detection of Histamine H1 receptor cDNA by situ hybridization; and 4. quantification of histamine H1receptor by RT-PCR. In this study, we have made progress in the determination of receptor in the whole brain tissue. 1. The identification of receptor in the whole brain tissue is based on the identification of receptor in the culture of trigeminal neurons, the pure culture of neurons, and the mixed culture of supporting cells such as neurons and cells. The three branches of the brain were cultured together. 2. The H1 receptor cDNA was used in situ hybridization and improved for most of the year. H1 receptor RNA prob in situ hybridization, positive control, positive control, positive control The result of the analysis is expected to be in the future.