落屑症候群における落屑物質の免疫電顕組織化学および2次元免疫電気泳動を用いた解析

免疫电子显微组织化学和二维免疫电泳分析脱屑综合征的脱屑物质

• 批准号: 07771525
• 负责人: 甘利 富士夫
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771525/
• 关键词: 落屑物質; 免疫電子顕微鏡組織化学; 画像解析装置; 2次元免疫電気泳動; プロテインシーケンサ

落屑物質は超微細構造をもち,採取できる量が限られているため,落屑物質の成分に関して,これまでは主として免疫電子顕微鏡組織化学的手法により,そのごく一部が明らかにされているに過ぎなかった.そこで本研究者は様々な種類の抗体を用いた免疫電子顕微鏡組織化学的研究により,成分の分析を進めると共に,画像解析装置を使用することにより,より詳細な分析,統計学的な検討を行った.さらに等電点と分子量で解析する2次元免疫電気泳動,およびプロテインシーケンサ(蛋白質1次構造分析装置)を用い,異なった角度からも落屑物質の成分分析を行い,両者の比較検討した.免疫電子顕微鏡組織化学的研究により,落屑物質にはビトロネクチンなど数種の蛋白の存在が確認された.画像解析装置を用いた分析にて,ビトロネクチンは線維柱帯の落屑物質において22.6±6.9,水晶体表面で20.6±4.8,結膜で21.3±5.5,皮膚で22.7±6.3といった金粒子の集積を示し,各部位間において統計学的有意差を認めなかった.フィブロンネクチン,ラミニン,エラスチンにおいても同様に統計学的有意差がみられず,線維柱帯,水晶体表面,結膜,皮膚といった異なった部位における落屑物質は,形態学的に僅かな違いはあるものの,抗原性は極めて近いことが立証された.落屑物質を含んだ水晶体嚢,および正常対照の水晶体嚢に対し2次元免疫電気泳動を行い,異なった部分を集積し,プロテインシーケンサにより落屑物質の蛋白質の1次構造を解析したところ,免疫電子顕微鏡化学的研究の結果に非常に近い値が得られた.症例数を増やした後,統計学的検討を行う予定である.

The ultra-fine structure of the debris material was cut off by using the method of immunoelectron microscopy histochemistry, and some parts of the debris were cut off by using the method of immunoelectron microscopy histochemistry. The present researchers have studied the use of immunoelectron microscopy histochemistry for various types of antibodies, and have conducted detailed analyses and statistical studies for the analysis of components and the use of image analysis devices. 2-D immunoelectrokinetic analysis of isoelectric point and molecular weight, and comparative analysis of different angles and components of debris. Immunoelectron microscopic histochemical studies confirmed the presence of several proteins in debris. Image analysis equipment used in the analysis, the production of dust particles in the linear column area is 22.6±6.9, the lens surface is 20.6±4.8, the conjunctiva is 21.3±5.5, the skin is 22.7±6.3, the accumulation of gold particles is 22.7±6.3, and the statistical intentional difference between each part is recognized. In addition, it is also necessary to study the relationship between the surface of lens, conjunctiva, skin and different parts of lens, debris, morphology, antigenicity and antigenicity. The results of the study on the primary structure of the protein of the debris, including the crystal structure of the debris, are very close to those of the normal crystal structure of the debris, and the results of the study on the immunoelectron microscopy are very close to those of the normal crystal structure of the debris. After the number of cases increased, statistical analysis was performed.