両生類の性腺分化時に特異的に発現する遺伝子の解析

两栖动物性腺分化过程中特异性表达的基因分析

• 批准号: 08640847
• 负责人: 中村 正久
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08640847/
• 关键词: Ad4BP; FTZ-F1; KIF3A; cDNA; 性腺; 両生類; ツチガエル

ヒト性決定遺伝子(SRY)が単離されて以来、脊椎動物の性決定及び性腺分化に係わる遺伝子がいくつか報告されている。その中でAd4BPは最初、ステロイドホルモンの生合成に関与するP-450遺伝子の転写調節因子として同定されたが、その後、多くの遺伝子の転写を制御することによって副腎及び生殖腺の分化に不可欠な因子であることが判明した。しかし、Ad4BP遺伝子が単離されたのはヒト、ウシ、ラットだけで哺乳類以外の脊椎動物にこの遺伝子が存在するかどうか不明であった。本研究によって哺乳類以外の脊椎動物から初めてツチガエルAd4BP遺伝子をクローニングし、その塩基配列を決定した。このcDNAは686のアミノ酸からなる蛋白質をコードしている。ウシAd4BPcDNAとアミノ酸レベルで68%の相同性があった。この遺伝子はノーザン解析で種々の成体組織の中で精巣だけに発現していることが分かった。また、RT-PCRによって初期胚(St.8)で発現が開始し、性線分化時期に発現が強まること、また、幼生期(St.IV-V)に雄性ホルモン(テストステロン)を投与すると発現が促進することも判明した。更に、両生類の性腺分化に関連する遺伝子としてFTZ-F1及びKIF3AcDNAをクローニングした。前者にはアミノ酸配列の異なる長短二つの遺伝子が存在し、それぞれ発現の時期と場所が異なることが分かった。KIF3A遺伝子については今までマウスけで単離されていたが、ツチガエルでも単離され哺乳類のみならず両生類にもこの遺伝子が存在することが明らかになった。cDNAは全長3.5kbpで699のアミノ酸をコードしていた。KIF3Aは精巣と脳で強く発現し、性腺分化に深く係わっていることが推測された。以上、性腺分化に係わる遺伝子として哺乳類以外の脊椎動物から4つの遺伝子を単離した。現在、これらの複数の遺伝子の発現時期及び場所、更に機能について検討している。

Sexually determining genes (SRY) have been reported since the early stages of vertebrate sex determination and gonadal differentiation. Ad4BP gene regulation factors related to gene synthesis and differentiation of adrenal gland were identified. Ad4 BP gene is isolated from vertebrates other than mammals. This study is aimed at determining the nucleotide sequence of non-mammalian vertebrates. The cDNA is 686 and the protein is 686. Ad4BP cDNA is 68% identical to the target gene. The analysis of the seed and the adult tissue is carried out in the middle of the seed and the adult tissue. RT-PCR was used to detect the early embryo stage (St.8), early differentiation stage (St.IV-V) and early male embryo stage (St.IV-V). In addition, the gene expression of FTZ-F1 and KIF3AcDNA is related to gonadal differentiation in human beings. The former refers to the existence of different acid sequences, and the existence of different acid sequences. KIF3A gene is present in mammals and mammals. The cDNA is 3.5kbp long and 699 bp long. KIF3A is highly expressed in sperm, and gonadal differentiation is deeply expressed in sperm. The above, gonadal differentiation in vertebrates other than mammals, 4, and genetic separation Now, there are several kinds of inheritance, such as the time and place of appearance, and the function of the inheritance.

项目成果

Yamamoto S., Kondo Y. etal.: "Strong expression of the calreticulin gene in the liver of Rana rugosa tadpoles, but not adult frogs" J. Experimental Zoology. 275. 431-443 (1996)

Yamamoto S.、Kondo Y. 等人：“钙网蛋白基因在林蛙蝌蚪的肝脏中强烈表达，但在成年青蛙中则不然”J. Experimental Zoology。

Miura I., OhtaniH. et al.: "Structural differences between XX and ZW sex lampbrush chromosomes in Rana rugosa females (anura : Ranidae)" Chromosoma. 105. 237-241 (1996)

三浦 I.，OhtaniH.

Miura I., Ohtani H. et al.: "Fluorescence replication banding of the frog chromosomes" Experientia. (in press). (1997)

Miura I.、Ohtani H. 等人：“青蛙染色体的荧光复制带”Experientia。

YamamotoS., NakamuraM: "Calrexin : its molecular cloning and expression in the liver of the froq, Rana rugosa" FEBS letters. 387. 27-31 (1996)

YamamotoS.，NakamuraM：“Calrexin：其分子克隆和在青蛙肝脏中的表达，Rana rugosa”FEBS 字母。

Kashiwagi A. et al.: "Comparison of catalase in diploid and haploid rana rugosa using heat and chemical inactivation techniques" Comp. Biochem. Physiol.(in press). (1997)

Kashiwagi A. 等人：“使用热和化学灭活技术比较二倍体和单倍体蛙中的过氧化氢酶”。