肝線維化の発生機序と制御に関する実験病理学的研究

(1).実験的肝線維化では、ラット肝のみならず、マウス肝においても、肝細胞壊死部に生じた線維化巣(主にC-C bridging fibrosisの形状を示す)にはα-平滑筋アクチン(ASMA)陽性の間質細胞の腫大、増生が目立つ。このASMA陽性細胞は経時的観察およびその微細構造学的特徴から、肝細胞壊死部の活性化あるいは筋線維芽細胞(MF)化した伊東細胞であることを実証した。(2).線維化の際の1つのkey eventである伊東細胞のMF化と同様な現象は、胎生末期に肝類洞壁の鍍銀線維が増量し、成人肝組織以上に密な格子構造が形成される時期の伊東細胞でも観察され(fetal myofibroblastic transformationと命名)、線維化の際の伊東細胞のMFの機序やその意義を考察する上で重要な知見を提供した。(3).肝線維化巣では初期には局所に浸潤したリンパ球様細胞、ついで類洞壁の細胞がTGF-β1で染色され、線維化の進展とパラクリンおよびオートクリン分泌されたTGF-β1との関連が強く示唆された。(4).伊東細胞のMF化機序を観察するために、ラット肝をpronase,collagenaseで消化潅流し、nycodenz比重遠心法により伊東細胞を分離し(河田法)、採取後7日までの培養に成功した。今回の研究により、以上のような知見や成果が得られたが、今後の課題あるいは研究目標としては;1.線維化巣内のTGF-β1陽性細胞は、in situ hybridization(ISH)の知識と技術をさらに習熟し、TGF-β1mRNAのシグナルを発現する細胞としてその増減や動態を観察する。さらに電顕ISH法を新開発し、細胞の同定をより確実に行う。2.肝線維化の制御に関しては、今回の研究で確立した伊東細胞の分離・培養法を用いて、in vitro studyにより検討する。

(1).実験的肝線維化では、ラット肝のみならず、マウス肝においても、肝細胞壊死部に生じた線維化巣(主にC-C bridging fibrosisの形状を示す)にはα-平滑筋アクチン(ASMA)陽性の間質細胞の腫大、増生が目立つ。このASMA陽性細胞は経時的観察およびその微細構造学的特徴から、肝細胞壊死部の活性化あるいは筋線維芽細胞(MF)化した伊東細胞であることを実証した。(2).線維化の際の1つのkey eventである伊東細胞のMF化と同様な現象は、胎生末期に肝類洞壁の鍍銀線維が増量し、成人肝組織以上に密な格子構造が形成される時期の伊東細胞でも観察され(fetal myofibroblastic transformationと命名)、線維化の際の伊東細胞のMFの機序やその意義を考察する上で重要な知見を提供した。(3).肝線維化巣では初期には局所に浸潤したリンパ球様細胞、ついで類洞壁の細胞がTGF-β1で染色され、線維化の進展とパラクリンおよびオートクリン分泌されたTGF-β1との関連が強く示唆された。(4).伊東細胞のMF化機序を観察するために、ラット肝をpronase,collagenaseで消化潅流し、nycodenz比重遠心法により伊東細胞を分離し(河田法)、採取後7日までの培養に成功した。今回の研究により、以上のような知見や成果が得られたが、今後の課題あるいは研究目標としては;1.線維化巣内のTGF-β1陽性細胞は、in situ hybridization(ISH)の知識と技術をさらに習熟し、TGF-β1mRNAのシグナルを発現する細胞としてその増減や動態を観察する。さらに電顕ISH法を新開発し、細胞の同定をより確実に行う。2.肝線維化の制御に関しては、今回の研究で確立した伊東細胞の分離・培養法を用いて、in vitro studyにより検討する。