肝微小転移モデルにおける.TNFの誘導体遺伝子導入腫瘍ワクチンの治療効果の検討

TNF衍生基因转移肿瘤疫苗在肝微转移模型中的治疗效果研究

• 批准号: 08670570
• 负责人: 樋口 清博
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670570/
• 关键词: Lac Z遺伝子; 微小癌転移; TNFα誘導体; 腫瘍ワクチン

今年度は、微小肝癌治療に先駆け、副作用を軽減する目的で開発された新しいTNF誘導体(F4614)肝癌細胞株に対するin vivoでの抗腫瘍効果メカニズムの検討と肝癌細胞株へのTNF誘導体の導入を試みた。マウス肝癌株(MH134)をマウウの皮下に接種後、5日間連日腫瘍内に5μgのF4614を投与し、その退縮の経過を免疫組織学的、細胞障害試験により解析した。また3種のヒト肝細胞癌株(HuH-7,PLC,Hep-3B)、ヒト胆管細胞癌株(HuCC-T1)にTNF誘導体遺伝子導入のためのベクターの設計に着手した。マウスでの抗腫瘍効果の検討では、F4614の腫瘍内投与によりTNF群と同程度に皮下腫瘍の有意な発現抑制を認めた(抑制率:50〜66%).F4614の腫瘍内投与を行なった一部のマウスで腫瘍は、完全退縮し,MH134の再投与にて腫瘤を形成しなかった.F4614投与群では投与24時間以内に腫瘍の出血壊死が生じ、1週後よりCD4、CD8陽性のリンパ球の浸潤が認められた。また細胞障害検査ではMH134に対する特異的な障害能の獲得は認められなかったが、有意なNK活性の増加が確認された。以上より、この新しいTNF誘導体は肝癌治療に有用であることが示唆された。現在TNF誘導体遺伝子導入を有効なベクターを設計している。今後は、マーカー遺伝子(Lac-Z遺伝子)を組み込んだ培養癌細胞株を用いて我々が開発したマウスの微小癌モデルにおける、F4614腫瘍ワクチンの治療効果を検討する予定である。

This year, the treatment of micro-hepatocellular carcinoma has been started, and the side effects have been reduced. The purpose of this year is to open a new TNF inducer (F4614) liver cancer cell line. The anti-tumor effect of vivo has been tested through the introduction of TNF inducer into liver cancer cell lines. After subcutaneous inoculation of MASUS liver cancer strain (MH134), 5 μg was injected into the tumor for 5 consecutive days. F4614 is used for injection, immunohistology, and analysis of cell damage test. The design of three types of hepatocellular carcinoma lines (HuH-7, PLC, Hep-3B) and cholangiocarcinoma line (HuCC-T1) and the introduction of TNF-inducible integuments was carried out. The anti-tumor effect of MASCULA and F4614 has been shown to be of the same degree in the treatment of subcutaneous tumors when administered internally to tumors. Inhibition of the appearance of the disease (inhibition rate: 50 ~ 66%). F4614 intramuscular injection and treatment of the disease The tumor has completely regressed, and the re-administration of MH134 has resulted in the formation of the tumor. F4614 has been administered to the group of 2. The bleeding and death of the swelling and infection within 4 hours were not confirmed, and the detection of infiltration of CD4 and CD8 positive neoplasms was confirmed after 1 week. The cell barrier function of MH134 has been confirmed. The specific barrier function has been obtained and confirmed, and the increase in NK activity has been confirmed. The above evidence shows that the new TNF inducer is useful in the treatment of liver cancer. Currently, TNF-inducing body parts are introduced and designed to be effective. From now on, we will cultivate cancer cell lines using Lac-Z's Lac-Z group. The therapeutic effect of the micro-cancer microcarcinoma and F4614 tumor infection is determined.