ノックアウトマウスによるGABA受容体遺伝子機能の解析

使用基因敲除小鼠分析 GABA 受体基因功能

• 批准号: 08671625
• 负责人: 浅田 英穂
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671625/
• 关键词: GABA; GAD; GABA受容体; ノックアウトマウス; ジーンターデティング

GABA受容体には、直接CIチャンネルと連結するGABA-A受容体と、G蛋白質を経てK^+チャンネルやCa^<2+>チャンネルに作用を及ぼすGABA-B受容体の2種類が存在する。ピクロトキシンやビククリン等のGABA-A受容体遮断薬により痙攣発作が起きることから、皮質のGABA受容体の機能不全がせんかんの発生に関与していると考えられている。GABA-Aレセプターは48-55kDaのα,β,γサブユニットからなり、ピクロトキシン、バルビツール酸誘導体やベンゾジアゼピン類との結合部位、さらにはステロイドに対する結合部位がある。本研究では、GABA-Aレセプターをジーンターゲティング法によってノックアウトしたマウスを作成し、正常マウスと比較することによってGABA-Aレセプターの生理機能を解析することを目的とした。申請者らは既に、GABA合成酵素であるグルタミン酸脱炭酸酵素(GAD)のジーンターデティングを進めてきた。GADにはGAD65とGAD67の2つのアイソフォームがありそれぞれのノックアウトマウスが誕生した(Asada et al.,BBRC 1996)。そのうちGAD67のノックアウトマウスでは生後まもなく死亡するが、口蓋裂をもつことが判明した。Culiat等によって作成されたGABA-Aレセプターβ3サブユニュトのノックアウトマウス(Nature Genet.1995)も同様に口蓋裂が見られることから、GABAが胎児の口蓋の発達において重要であることが示された。ベンゾジアゼピン結合部であるγ2サブユニュトのノックアウトマウスもGunther等によって作成された(PNAS 1995)が、GABAの結合には変化がみられなかった。申請者らは、大脳皮質や海馬をはじめ中枢神経に広範に分布し、胎児期には発現が少なく生後増大するGABA-A受容体α1サブユニュトに焦点をあててタ-デティングベクターを作成中である。

GABA is let body に は, direct CI チ ャ ン ネ ル と link す る GABA - A let body と, G protein を 経 て K ^ + チ ャ ン ネ ル や Ca ^ 2 + > < チ ャ ン ネ ル に を and ぼ す GABA - B by body の 2 kinds が exists す る. ピ ク ロ ト キ シ ン や ビ ク ク リ ン の GABA - A such as the capacity of body interrupt 薬 に よ り spasm 発 as が up き る こ と か ら, cortex の GABA let body の insufficiency が せ ん か ん の 発 raw に masato and し て い る と exam え ら れ て い る. GABA - A レ セ プ タ ー は 48-55 kda の alpha, beta, gamma サ ブ ユ ニ ッ ト か ら な り, ピ ク ロ ト キ シ ン, バ ル ビ ツ ー ル acid induced body や ベ ン ゾ ジ ア ゼ ピ ン class と の combining site, さ ら に は ス テ ロ イ ド に す seaborne る combining site が あ る. This study で は, GABA - A レ セ プ タ ー を ジ ー ン タ ー ゲ テ ィ ン グ method に よ っ て ノ ッ ク ア ウ ト し た マ ウ ス を made し, normal マ ウ ス と compare す る こ と に よ っ て GABA - A レ セ プ タ ー の physiology を parsing す る こ と を purpose と し た. Applicants ら は に, GABA synthesis enzyme で あ る グ ル タ ミ ン acid decarburization acid enzyme (GAD) の ジ ー ン タ ー デ テ ィ ン グ を into め て き た. GAD に は GAD65 と GAD67 の 2 つ の ア イ ソ フ ォ ー ム が あ り そ れ ぞ れ の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス が born し た (Asada et al., 1996) BBRC. そ の う ち GAD67 の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス で は postnatal ま も な く death す る が, flap を も つ こ と が.at し た. Culiat etc に よ っ て made さ れ た GABA - A レ セ プ タ ー beta 3 サ ブ ユ ニ ュ ト の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス (Nature Genet, 1995) も with others に flap crack が see ら れ る こ と か ら, GABA が tire where の flap の 発 da に お い て important で あ る こ と が shown さ れ た. ベ ン ゾ ジ ア ゼ ピ ン bungalows で あ る gamma 2 サ ブ ユ ニ ュ ト の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス も Gunther etc に よ っ て made さ れ た が (PNAS (1995), GABA の に は variations change が み ら れ な か っ た. Applicants ら は, big 脳 や hippocampus cortex を は じ め central god 経 に hiroo van し に distribution, tire where に は 発 が now less な く rights after big す る GABA - A by alpha 1 let body サ ブ ユ ニ ュ ト に focus を あ て て タ - デ テ ィ ン グ ベ ク タ ー を made in で あ る.