周産期における誘導型一酸化窒素合成酵素の局在と発現に関する研究

围产期诱导型一氧化氮合酶定位及表达研究

• 批准号: 08671922
• 负责人: 飯田 幸雄
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Saitama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08671922/
• 关键词: 妊娠ラット; エンドトキシン; リボポリサッカライド(LPS); 一酸化窒素合成酵素

[目的及び方法]周産期における誘導型一酸化窒素合成酵素(inducible nitric oxide synthase ;iNOS)の挙動については現在のところ不明である。そこで妊娠ラットにエンドドキシンを投与し、諸臓器における組織学的変化とiNOSの発現の有無を検討した。13週齢の非妊娠および妊娠ラット(SD)(妊娠18日目)にlipopolysaccharide[LPS(E.coli;O55,B5)]を0〜20mgを尾静脈より投与し、50%致死量(LD_<50>)を検討した。また同妊娠ラットに対し非妊娠時体重(kg)あたりLPS4mg(mg/b.w.)を投与し5時間後、肝、腎および胎盤の各臓器を摘出した。各臓器をhomogenizeしたのち超遠心後、可溶分画より2',5'-ADP agaroseにてNOS部分精製分画を描出した(ADP pool)。各臓器よりのADP poolを7.5%SDS電気泳動(SDS-PAGE)にて分離した。nylon membraneに転写しiNOSに対する抗体を一次抗体としてwestern blottingを行いiNOSの発現の有無を検討した。[結果]非妊娠および妊娠ラットのLPSに対するLD_<50>はそれぞれ11mg/b.w.,1.3mg/b.w.であった。妊娠群の肝臓は、非妊娠群と比較してグリソン氏鞘を中心としたより広範な出血性壊死を認め、腎臓でも尿細管壊死が著明であった。LPS投与群妊娠ラットの肝臓、腎臓、ならびに胎盤においてSDS-PAGE上、分子量130kDaの誘導型蛋白が出現した。この蛋白はiNOSに対する抗体に反応した。[結論]妊娠時にはLPSに対する感受性が著しく増加し、低濃度のエンドトキシンでも致死的である事が示唆された。また同時に、妊娠ラットにおいてLPSを投与することにより肝、腎および胎盤の多臓器においてiNOSが発現することが判明した。

[Objective and Methods] The activity of inducible nitric oxide synthase (iNOS) in the perinatal period is unknown. The histological changes and the occurrence of iNOS in pregnant women were discussed. At 13 weeks of gestation, when not pregnant (SD)(18 days of gestation), lipopolysaccharide[LPS(E.coli; O55,B5)] was administered intravenously from 0 to 20mg, 50% lethal dose (LD_<50>). Weight (kg) during pregnancy LPS4mg(mg/b.w.) 5 hours later, liver, kidney and placenta organs are extracted. Each device is homogenized and separated into 2', 5'-ADP agar and NOS partially refined into ADP pool. The separation of the protein by SDS-PAGE was studied. The presence or absence of iNOS in nylon membrane [Results] The LD_r of LPS in non-pregnant <50>and pregnant women was 11mg/b.w., 1.3mg/b.w.であった。Pregnant and non-pregnant women are more likely to be pregnant than pregnant women. LPS administration resulted in the appearance of an inducible protein with molecular weight of 130kDa in the liver, kidney and placenta. This is the first time [Conclusion] In pregnancy, the susceptibility to LPS increased, and the lethal effect of LPS at low concentrations increased. It was found that LPS was present in the liver, kidney and placenta.