NAP1たんぱくの細胞骨格に対するシャペロンとしての作用

NAP1 蛋白作为细胞骨架伴侣的作用

• 批准号: 10172209
• 负责人: 菊池 韶彦
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10172209/
• 关键词: Nap1; TWO HYBRID SYSTEM; NBP1温度感受性変異株; SETたんぱく; 抗体; ウイルスゲノム複製; 酸性分子シャペロン; インフルエンザウイルス

1. Nap1p結合たんぱくの解析:Nap1pとの相互作用を目安としてTWO HYBRID SYSTEMによりえられた遺伝子NBP1とNBP2はともにコイルドコイルの領域を分子内にもつたんぱくをコードし、細胞骨格との関連が示唆される。NBP1は酵母の生育に必須な遺伝子なので、温度感受性変異株を単離する事を試み、PCR法によりランダムに変異を導入し目的の変異を株を得て、詳しく解析中である。また、NBP1pのC末端にタグをつけた産物は多量に発現しないとnbpl欠失変異株を相補しないことから、この領域に機能の一部があることがわかった。2. 酵母SETたんぱくの解析:酵母のSet欠質変異株はほとんど正常に生育し、またNap1.あるいはサイクリンとの二重変異株でも明瞭な表現型は示さなかった。GFPと融合させたSETたんぱくは核に局在し、Nap1pとは明らかに独立に働くものと考えざるを得ない。SETたんぱくに対する抗体を作成したので、様々な組織や細胞内でのSETたんぱくの発現パターンを明らかにした。TWO HYBRID SYSTEMを使い相互作用をするたんぱくをスクリーンしたが、有意と考えられるものは得られなかった。3. ウイルスゲノム複製にかかわる酸性分子シャペロン:アデノウイルスで得られたTAF1/SETの成果をインフルエンザウイルスの系の様にRNA-塩基性たんぱく複合体が本当の鋳型として働くゲノム形態の異なるレプリコンの系にまでひろげてTAF1/SETのより一般的な機能を検討している。

1. Nap1p binding analysis:Nap1p interaction analysis: Nap 1 p interaction analysis analysis NBP1 is an essential gene for yeast growth, a temperature-sensitive mutant strain isolated by PCR, a mutant introduced by PCR, and a mutant strain analyzed in detail. The C-terminal of NBP1p is a part of the domain function. 2. Yeast SET analysis: Yeast Set poor heterozygote is opposite to normal fertility, Nap1. It is opposite to double heterozygote phenotype. GFP fusion today SET Set the day to make the antibody, set the day to make the tissue, set the day to make the discovery. TWO HYBRID SYSTEM makes interaction possible. 3. It is necessary to copy the acid molecule from TAF1/SET, and to obtain the result from TAF1/SET. The RNA-based complex is used to describe the basic function of TAF1/SET.

项目成果

S.KATO and A.KIKUCHI: "“DNA Topoisomerase:The key enzyme that regulates DNA super structure" Nagoya Journal of Medical Sciences. 61. 11-26 (1998)

S.KATO 和 A.KIKUCHI：“DNA 拓扑异构酶：调节 DNA 超结构的关键酶”名古屋医学科学杂志 61. 11-26 (1998)。

K.YODA et al.: "“In vitro assembly of the CENP-B/a-satellite DNA/core histone complex:CENP-Bcauses nucleosome positioning" Genes to Cells. 3. 533-548 (1998)

K.YODA 等人：“CENP-B/a-卫星 DNA/核心组蛋白复合物的体外组装：CENP-B 导致核小体定位”Genes to Cells 3. 533-548 (1998)。

K.NAGATA et al.: "Cellular localization and expression of template-activating tactor I in different cell types" Experimental Cell Research. 240. 274-281 (1998)

K.NAGATA 等人：“模板激活因子 I 在不同细胞类型中的细胞定位和表达”实验细胞研究。

K.TANOGUCHI et al.: "Immunohistochemical and two-parameter flow cytometric studies of DNA topoisomerase II α in human epithelial ovalian carcinoma and germ cell tumor" Modern Pathology. 11. 186-193 (1998)

K.TANOGUCHI 等人：“人上皮性卵巢癌和生殖细胞肿瘤中 DNA 拓扑异构酶 II α 的免疫组织化学和双参数流式细胞术研究”现代病理学 11. 186-193 (1998)。

K.SUGIMOTO et al.: "Temporal and spatial distribution of DNA topoisomerase II alters during proliferation,differenciation and apoptosis in HL-60 cells" Blood. 91. 1407-1417 (1998)

K.SUGIMOTO 等人：“HL-60 细胞增殖、分化和凋亡过程中 DNA 拓扑异构酶 II 的时间和空间分布发生变化”血液。