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アクトミオシンモーター分子のストレイン依存ヌクレオチド結合状態の寿命解析

肌动球蛋白运动分子菌株依赖性核苷酸结合状态的寿命分析

基本信息

批准号：
10175219
负责人：
茶圓茂
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10175219/
关键词：
アクトミオシンモータ蛋白ストレイン 1分子過程

项目摘要

『生物分子モーターの1方向性の運動はどのようにしておこるのか?』の問題に対して、いろいろな説明が提出されている。生物分子モーターのひとつであるアクトミオシン系ではその説明のひとつとして、『滑りの力を発生する正のストレインのところでアクチンとミオシンは解離しないで、ストレインが小さい、あるいは負のところで解離しやすいというバイアスを利用している』という考えがある。平成9年度の本重点領域研究の公募班員としての研究では、筋原線維のATPターンオーバーがストレインに依存することを直接的に示し、上記の説のようなバイアスの存在を示唆した。平成10年度の研究では、研究対象を筋原線維からアクチンフィラメントとミオシンのレベルまで下げ、このstrain依存ADP遊離速度の性質がモータータンパクに内在するものかどうかを調べた。実験は、HMMトラック&アクチンフィラメントに結合した蛍光性ATPアナログ(Cy3nucleotide)がCagedATPの光分解で放出されるATPに置き換わっていく速度とアクチンフィラメントがHMMトラック上を滑る速度をストレインがかかる条件下で同時測定した。クロスブリッジにストレインのかける方法は正常のHMMのほかに、滑りの負荷となるNEM処理HMMを混ぜることで行った。アクチンフィラメントはCy5蛍光色素で標識し、ATPにはCy3-EDA-ATPを用い、そのイメージングはW-VIEW光学ユニットと、エバネエッセント励起による蛍光イメージング装置を組立、使用した。実験の結果は、負荷の程度(NEM処理HMMの割合)によらず置換速度はほぼ一定であった。さらに、現在、直接、アクチンフィラメントがHMMトラック上を滑る間のCy3nucleotideがアクトミオシンに結合している寿命を測定する実験を進めている。

"Biomolecular movement of 1 directional motion, reverse motion, reverse motion" The problem is solved in the middle of the problem. The biological component is divided into two parts: the first part is divided into three parts: the second part is divided into three parts: the third part is divided into three parts: the fourth part is divided into four parts: the fourth part is divided into three parts: the fourth part is divided into four parts: the fourth part is divided into four In 2009, the research team of this key area was directly involved in the study of ATP and its dependence on the tendon. The research of Heisei 10 years is to study the characteristics of strain-dependent ADP ionization velocity. In this paper, HMM is determined simultaneously under the condition that HMM is bound to ATP (Cy3 nucleotide) and ATP is released from ATP by photolysis. NEM processes HMM from normal to load. Cy5-EDA-ATP, Cy3-EDA-ATP, Cy The result is that the degree of load (NEM processing HMM) is not stable. The cy3 nucleotide is used to determine the life span of the HMM.