アクトミオシンモーター分子のストレイン依存ヌクレオチド結合状態の寿命解析

肌动球蛋白运动分子菌株依赖性核苷酸结合状态的寿命分析

• 批准号: 11156221
• 负责人: 茶圓 茂
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11156221/
• 关键词: アクトミオシン; モータ蛋白; ストレイン; 1分子過程

『生物分子モーターの1方向性の運動はどのようにしておこるのか?』の問題に対して、いろいろな説明がなされている。生物分子モーターのひとつであるアクトミオシン系ではその説明のひとつは、『滑りの力を発生する正のストレインのところでアクチンとミオシンは解離しにくいが、ストレインが小さい、あるいは負のところで解離しやすいことを利用している』という考えである。この説を検証する目的で1997年にウサギ骨格筋速筋の筋原線維のATPターンオーバーを蛍光ATPとケージドATPを用いて、ATPターンオーバーがストレインに依存することを示し、上記の説のようなバイアスの存在を示唆した。その後、この実験測定の確度を調べる目的でウサギ骨格筋遅筋の筋原線維で同様の実験を行った。そして同じ結論に至り、この論文はBiophysical Joural 誌2000年2月号に掲載された。現在はアクトミオシンモーター分子のレベルで検討する目的で、そのアクトミオシンに結合している蛍光ヌクレオチドの寿命がストレインに依存するかどうかの実験を行っている。アクトミオシンに結合している蛍光ヌクレオチドの寿命はPrismless TIRFM で観察するが、その寿命測定はアクトミオシンATPの反応が速いため通常のビデオイメージングでは時間分解能が1/30秒の限界がある。この時間分解能をあげる目的でTIRFMからの蛍光ヌクレオチドのスポット像をミラー(DUAL VIEW装置のヌクレオチドの蛍光像が通る光路にあるミラー)を振動させ、ビデオ画像上にそのスポットの軌跡として記録する装置を製作し、時間分解能を上げるビデオイメージングに成功した。現在、アクトミオシンにストレインがかかった状態での結合ヌクレオチドの寿命の測定を進めている。

"Biomolecular movement of 1 directional motion, reverse motion, reverse motion" The problem is solved in the middle of the problem. The biological components are separated from each other, and the biological components are separated from each other. The biological components are separated from each other, and the biological components are separated from each other. The biological components are separated from each other, and the biological components are separated from each other. In 1997, it was announced that ATP and ATP would be used and dependent on each other. The accuracy of the measurement is adjusted for the purpose of maintaining the original dimension of the tendon. This paper was published in February 2000 in Biophysical Journal. Now, for the purpose of molecular selection, the selection process is combined with the selection process, and the life span of the selection process is dependent on the selection process. The time limit for determining the lifetime of ATP is 1/30th of a second. For this purpose, the TIRFM can be used to produce a device for recording the track of vibration and video images. Now, the test of the life of the product is carried out in combination with the test of the product.

项目成果

Ibuki Shirakawa: "Measurement of nucleotide exchange rate constrants in single rabbit solevs myofibrils during shortening and lengthening using a fluorescent ATP analog"Biophysical Journal. 78. 918-926 (2000)

Ibuki Shirakawa：“使用荧光 ATP 类似物测量单只兔子中肌原纤维在缩短和延长过程中的核苷酸交换率常数”生物物理学杂志。